青海医学院学报
青海醫學院學報
청해의학원학보
JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE
2012年
1期
27-30
,共4页
胃癌细胞%REG4%RNA干扰%增殖及凋亡
胃癌細胞%REG4%RNA榦擾%增殖及凋亡
위암세포%REG4%RNA간우%증식급조망
目的 探讨体外RNA干扰抑制REG4基因表达对胃癌细胞增殖及凋亡的影响.方法 应用实时定量PCR方法检测七株胃癌细胞株中REG4基因的mRNA表达.针对REG4基因设计三条小干扰RNA片段(siRNA1、siRNA2、siRNA3),瞬时转染高表达胃癌细胞株.用RT-PCR方法检测转染后REG4基因的mRNA表达水平、MTT法检测细胞增殖能力、AnnexinV-PI法检测细胞凋亡水平.结果 以永生化正常胃粘膜细胞株GES-1作为参照.MKN-45和AGS胃癌细胞株中REG4表达水平升高200倍以上,遂选用AGS细胞进行RNA干扰.RT-PCR结果证实siRNA2、siRNA3均有干扰效果,尤以siRNA3效果明显.选用siRNA3干扰AGS细胞株,MTT实验结果证实干扰AGS后,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05).AnnexinV-PI实验结果显示细胞凋亡率明显增加(P<0.05).结论 干扰REG4基因具有抑制胃癌细胞增殖、促进凋亡的作用,REG4基因可能成为胃癌基因靶向治疗的新靶点.
目的 探討體外RNA榦擾抑製REG4基因錶達對胃癌細胞增殖及凋亡的影響.方法 應用實時定量PCR方法檢測七株胃癌細胞株中REG4基因的mRNA錶達.針對REG4基因設計三條小榦擾RNA片段(siRNA1、siRNA2、siRNA3),瞬時轉染高錶達胃癌細胞株.用RT-PCR方法檢測轉染後REG4基因的mRNA錶達水平、MTT法檢測細胞增殖能力、AnnexinV-PI法檢測細胞凋亡水平.結果 以永生化正常胃粘膜細胞株GES-1作為參照.MKN-45和AGS胃癌細胞株中REG4錶達水平升高200倍以上,遂選用AGS細胞進行RNA榦擾.RT-PCR結果證實siRNA2、siRNA3均有榦擾效果,尤以siRNA3效果明顯.選用siRNA3榦擾AGS細胞株,MTT實驗結果證實榦擾AGS後,細胞增殖受到明顯抑製(P<0.05).AnnexinV-PI實驗結果顯示細胞凋亡率明顯增加(P<0.05).結論 榦擾REG4基因具有抑製胃癌細胞增殖、促進凋亡的作用,REG4基因可能成為胃癌基因靶嚮治療的新靶點.
목적 탐토체외RNA간우억제REG4기인표체대위암세포증식급조망적영향.방법 응용실시정량PCR방법검측칠주위암세포주중REG4기인적mRNA표체.침대REG4기인설계삼조소간우RNA편단(siRNA1、siRNA2、siRNA3),순시전염고표체위암세포주.용RT-PCR방법검측전염후REG4기인적mRNA표체수평、MTT법검측세포증식능력、AnnexinV-PI법검측세포조망수평.결과 이영생화정상위점막세포주GES-1작위삼조.MKN-45화AGS위암세포주중REG4표체수평승고200배이상,수선용AGS세포진행RNA간우.RT-PCR결과증실siRNA2、siRNA3균유간우효과,우이siRNA3효과명현.선용siRNA3간우AGS세포주,MTT실험결과증실간우AGS후,세포증식수도명현억제(P<0.05).AnnexinV-PI실험결과현시세포조망솔명현증가(P<0.05).결론 간우REG4기인구유억제위암세포증식、촉진조망적작용,REG4기인가능성위위암기인파향치료적신파점.