中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2003年
3期
221-226
,共6页
杨益良%梁国栋%付士红%苏乃伦%邓娟%侯云德
楊益良%樑國棟%付士紅%囌迺倫%鄧娟%侯雲德
양익량%량국동%부사홍%소내륜%산연%후운덕
XJ-160病毒%辛德毕斯病毒%复制子载体
XJ-160病毒%辛德畢斯病毒%複製子載體
XJ-160병독%신덕필사병독%복제자재체
XJ-160病毒是我国首次分离的辛德毕斯病毒,全基因组测序已经完成.本文利用该病毒全基因序列首先构建了全基因组cDNA克隆质粒,在此基础上,利用基因重组技术将病毒结构基因序列替换为含有多个单酶切位点的序列,得到复制子表达载体质粒pRepxj160.为验证载体的功能,将报告基因绿色荧光蛋白(EGFP)和β-半乳糖苷酶基因(lacZ)分别插入到载体的多克隆位点,得到两个表达质粒;经体外转录获得的转录体RNA转染BHK-21细胞后14h,可检测到报告基因的表达.结果表明我们构建的XJ-160病毒复制子型表达载体具有自主复制功能,可以表达异源基因.本研究为进一步开发具有我国自主知识产权的甲病毒载体奠定了基础.
XJ-160病毒是我國首次分離的辛德畢斯病毒,全基因組測序已經完成.本文利用該病毒全基因序列首先構建瞭全基因組cDNA剋隆質粒,在此基礎上,利用基因重組技術將病毒結構基因序列替換為含有多箇單酶切位點的序列,得到複製子錶達載體質粒pRepxj160.為驗證載體的功能,將報告基因綠色熒光蛋白(EGFP)和β-半乳糖苷酶基因(lacZ)分彆插入到載體的多剋隆位點,得到兩箇錶達質粒;經體外轉錄穫得的轉錄體RNA轉染BHK-21細胞後14h,可檢測到報告基因的錶達.結果錶明我們構建的XJ-160病毒複製子型錶達載體具有自主複製功能,可以錶達異源基因.本研究為進一步開髮具有我國自主知識產權的甲病毒載體奠定瞭基礎.
XJ-160병독시아국수차분리적신덕필사병독,전기인조측서이경완성.본문이용해병독전기인서렬수선구건료전기인조cDNA극륭질립,재차기출상,이용기인중조기술장병독결구기인서렬체환위함유다개단매절위점적서렬,득도복제자표체재체질립pRepxj160.위험증재체적공능,장보고기인록색형광단백(EGFP)화β-반유당감매기인(lacZ)분별삽입도재체적다극륭위점,득도량개표체질립;경체외전록획득적전록체RNA전염BHK-21세포후14h,가검측도보고기인적표체.결과표명아문구건적XJ-160병독복제자형표체재체구유자주복제공능,가이표체이원기인.본연구위진일보개발구유아국자주지식산권적갑병독재체전정료기출.
