CAJ | 학술논문

根据已知的耐药基因序列设计出检测四环素耐药基因特异探针7条、β-内酰胺类耐药基因特异探针5条,阳性坐标探针1条,长度为18-21 bp.根据探针序列两侧的保守区域设计了耐药基因扩增引物,引物长度17-20bp.通过荧光聚合酶链式反应,从耐药菌株中获得四环素耐药基因7个,β-内酰胺类耐药基因5个.经过芯片制作过程优化试验和芯片杂交优化试验,结果表明,将探针以终浓度30 μmol/L溶于50%DMSO中,在温度为20 C、湿度为70%的条件下点印于Aldehydeslide表面.扩增出的荧光标记产物经纯化后与2×杂交液混合,再与基因芯片在42 C杂交5 h可检测到理想的杂交信号.芯片灵敏度试验结果表明,当模板拷贝数大于1×103个/μL时,可检测到较强的杂交信号.本试验最终研制出灵敏度高、特异性强的耐药基因检测芯片.
근거이지적내약기인서렬설계출검측사배소내약기인특이탐침7조、β-내선알류내약기인특이탐침5조,양성좌표탐침1조,장도위18-21 bp.근거탐침서렬량측적보수구역설계료내약기인확증인물,인물장도17-20bp.통과형광취합매련식반응,종내약균주중획득사배소내약기인7개,β-내선알류내약기인5개.경과심편제작과정우화시험화심편잡교우화시험,결과표명,장탐침이종농도30 μmol/L용우50%DMSO중,재온도위20 C、습도위70%적조건하점인우Aldehydeslide표면.확증출적형광표기산물경순화후여2×잡교액혼합,재여기인심편재42 C잡교5 h가검측도이상적잡교신호.심편령민도시험결과표명,당모판고패수대우1×103개/μL시,가검측도교강적잡교신호.본시험최종연제출령민도고、특이성강적내약기인검측심편.