吉林大学学报（医学版）
吉林大學學報（醫學版）
길림대학학보（의학판）
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2008年
3期
442-445
,共4页
吕佳音%吴丹凯%徐春华%张舵舵%吴丹华%高忠礼%赵燕颖
呂佳音%吳丹凱%徐春華%張舵舵%吳丹華%高忠禮%趙燕穎
려가음%오단개%서춘화%장타타%오단화%고충례%조연영
siRNA%MDM2%骨肉瘤%逆转录聚合酶链反应
siRNA%MDM2%骨肉瘤%逆轉錄聚閤酶鏈反應
siRNA%MDM2%골육류%역전록취합매련반응
目的:研究siRNA对人骨肉瘤U20S细胞MDM2基因表达及肿瘤细胞增殖的抑制作用.方法:构建可表达针对MDM2的siRNA质粒(PGCsilencerTM-MDM2-siRNA).转染siRNA MDM2(简称siMDM2),阴性对照质粒到U20S,并设只加转染试剂作空白对照组,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting法检测siMDM2对MDM2基因和蛋白表达的抑制作用,并用MTT法检测siMDM2对细胞增殖的抑制作用.结果:RT-PCR结果显示,转染siMDM2-1和-2组MDM2的mRNA表达量分别下调到空白对照组的32.61%和39.06%;Western blotting结果显示,转染siMDM2-1和-2组蛋白表达量下调到空白对照组的35.76%和42.20%;转染阴性对照质粒的MDM2基因和蛋白与转染试剂组比较差异均无显著性(P>0.05).MTT结果显示,转染siMDM2后细胞生长受到明显抑制,与转染试剂组比较差异具有显著性(P<0.05),阴性对照组抑制率与转染试剂组比较差异无显著性(P>0.05).结论:siRNA可以有效地抑制U20S细胞中MDM2的表达,并抑制细胞增殖.
目的:研究siRNA對人骨肉瘤U20S細胞MDM2基因錶達及腫瘤細胞增殖的抑製作用.方法:構建可錶達針對MDM2的siRNA質粒(PGCsilencerTM-MDM2-siRNA).轉染siRNA MDM2(簡稱siMDM2),陰性對照質粒到U20S,併設隻加轉染試劑作空白對照組,用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)和Western blotting法檢測siMDM2對MDM2基因和蛋白錶達的抑製作用,併用MTT法檢測siMDM2對細胞增殖的抑製作用.結果:RT-PCR結果顯示,轉染siMDM2-1和-2組MDM2的mRNA錶達量分彆下調到空白對照組的32.61%和39.06%;Western blotting結果顯示,轉染siMDM2-1和-2組蛋白錶達量下調到空白對照組的35.76%和42.20%;轉染陰性對照質粒的MDM2基因和蛋白與轉染試劑組比較差異均無顯著性(P>0.05).MTT結果顯示,轉染siMDM2後細胞生長受到明顯抑製,與轉染試劑組比較差異具有顯著性(P<0.05),陰性對照組抑製率與轉染試劑組比較差異無顯著性(P>0.05).結論:siRNA可以有效地抑製U20S細胞中MDM2的錶達,併抑製細胞增殖.
목적:연구siRNA대인골육류U20S세포MDM2기인표체급종류세포증식적억제작용.방법:구건가표체침대MDM2적siRNA질립(PGCsilencerTM-MDM2-siRNA).전염siRNA MDM2(간칭siMDM2),음성대조질립도U20S,병설지가전염시제작공백대조조,용역전록취합매련반응(RT-PCR)화Western blotting법검측siMDM2대MDM2기인화단백표체적억제작용,병용MTT법검측siMDM2대세포증식적억제작용.결과:RT-PCR결과현시,전염siMDM2-1화-2조MDM2적mRNA표체량분별하조도공백대조조적32.61%화39.06%;Western blotting결과현시,전염siMDM2-1화-2조단백표체량하조도공백대조조적35.76%화42.20%;전염음성대조질립적MDM2기인화단백여전염시제조비교차이균무현저성(P>0.05).MTT결과현시,전염siMDM2후세포생장수도명현억제,여전염시제조비교차이구유현저성(P<0.05),음성대조조억제솔여전염시제조비교차이무현저성(P>0.05).결론:siRNA가이유효지억제U20S세포중MDM2적표체,병억제세포증식.
