化学学报
化學學報
화학학보
ACTA CHIMICA SINICA
2008年
16期
1929-1934
,共6页
王梦凡%贾辰熙%齐崴%何志敏
王夢凡%賈辰熙%齊崴%何誌敏
왕몽범%가신희%제외%하지민
胰蛋白酶%交联酶聚体%固定化%酶的稳定性
胰蛋白酶%交聯酶聚體%固定化%酶的穩定性
이단백매%교련매취체%고정화%매적은정성
交联酶聚体(CLEA)是一种新型的无载体固定化技术.以胰蛋白酶为模型体系,系统地研究了CLEA技术的制备工艺、应用条件、稳定性及结构形貌.(1)在制备工艺中考察了各步骤对CLEA酶活保留的影响,重点分析了沉淀剂浓度、类型的影响,结果表明100%乙醇是较为理想的沉淀剂;(2)在应用条件确定巾测定CLEA的最适催化温度为70℃,最适催化pH为9.0,并解释了温度-活性、pH-活性曲线的漂移现象;(3)稳定性研究结果表明CLEA技术大幅提高了胰蛋白酶的热稳定性、溶剂稳定性,且无酶泄漏;(4)在形貌表征中分别利用扫描电子显微镜、光学显微镜和激光粒度分析对CLEA的微观结构进行了多尺度研究,着重讨论了其独特结构与优良特性间的关系.本文所得结论为胰蛋白酶CLEA的应用提供基础数据,并为CLEA技术应用于其它酶种提供参考.
交聯酶聚體(CLEA)是一種新型的無載體固定化技術.以胰蛋白酶為模型體繫,繫統地研究瞭CLEA技術的製備工藝、應用條件、穩定性及結構形貌.(1)在製備工藝中攷察瞭各步驟對CLEA酶活保留的影響,重點分析瞭沉澱劑濃度、類型的影響,結果錶明100%乙醇是較為理想的沉澱劑;(2)在應用條件確定巾測定CLEA的最適催化溫度為70℃,最適催化pH為9.0,併解釋瞭溫度-活性、pH-活性麯線的漂移現象;(3)穩定性研究結果錶明CLEA技術大幅提高瞭胰蛋白酶的熱穩定性、溶劑穩定性,且無酶洩漏;(4)在形貌錶徵中分彆利用掃描電子顯微鏡、光學顯微鏡和激光粒度分析對CLEA的微觀結構進行瞭多呎度研究,著重討論瞭其獨特結構與優良特性間的關繫.本文所得結論為胰蛋白酶CLEA的應用提供基礎數據,併為CLEA技術應用于其它酶種提供參攷.
교련매취체(CLEA)시일충신형적무재체고정화기술.이이단백매위모형체계,계통지연구료CLEA기술적제비공예、응용조건、은정성급결구형모.(1)재제비공예중고찰료각보취대CLEA매활보류적영향,중점분석료침정제농도、류형적영향,결과표명100%을순시교위이상적침정제;(2)재응용조건학정건측정CLEA적최괄최화온도위70℃,최괄최화pH위9.0,병해석료온도-활성、pH-활성곡선적표이현상;(3)은정성연구결과표명CLEA기술대폭제고료이단백매적열은정성、용제은정성,차무매설루;(4)재형모표정중분별이용소묘전자현미경、광학현미경화격광립도분석대CLEA적미관결구진행료다척도연구,착중토론료기독특결구여우량특성간적관계.본문소득결론위이단백매CLEA적응용제공기출수거,병위CLEA기술응용우기타매충제공삼고.
