太阳能学报
太暘能學報
태양능학보
ACTA ENERGIAE SOLARIS SINICA
2009年
6期
829-832
,共4页
赵锦芳%程军%戚峰%张传溪
趙錦芳%程軍%慼峰%張傳溪
조금방%정군%척봉%장전계
氢气%阴沟肠杆菌%铁氢酶%原核表达%发酵
氫氣%陰溝腸桿菌%鐵氫酶%原覈錶達%髮酵
경기%음구장간균%철경매%원핵표체%발효
合成Enterobacter doacae ⅡT-BT 08的铁氢酶(hydA)基因片段,PCR扩增出全长ORF.将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2,构建了表达质粒pGEX-4T-2-hydA,转化大肠杆菌BL21(DE3)并在IPIG诱导下表达.SDS-PAGE分析表明在约42kDa处有特异性条带.用抗GST多克隆抗体对GST-hydA融合蛋白进行了Western blot检测,进一步证明了hydA得到了正确的融合表达.产氢活性检测结果表明表达的重组hydA在大肠杆菌中具有明显的产氢活性.测定了培养基初始pH值、温度和底物浓度对重组大肠杆菌产氢的影响.
閤成Enterobacter doacae ⅡT-BT 08的鐵氫酶(hydA)基因片段,PCR擴增齣全長ORF.將目的基因剋隆到原覈錶達載體pGEX-4T-2,構建瞭錶達質粒pGEX-4T-2-hydA,轉化大腸桿菌BL21(DE3)併在IPIG誘導下錶達.SDS-PAGE分析錶明在約42kDa處有特異性條帶.用抗GST多剋隆抗體對GST-hydA融閤蛋白進行瞭Western blot檢測,進一步證明瞭hydA得到瞭正確的融閤錶達.產氫活性檢測結果錶明錶達的重組hydA在大腸桿菌中具有明顯的產氫活性.測定瞭培養基初始pH值、溫度和底物濃度對重組大腸桿菌產氫的影響.
합성Enterobacter doacae ⅡT-BT 08적철경매(hydA)기인편단,PCR확증출전장ORF.장목적기인극륭도원핵표체재체pGEX-4T-2,구건료표체질립pGEX-4T-2-hydA,전화대장간균BL21(DE3)병재IPIG유도하표체.SDS-PAGE분석표명재약42kDa처유특이성조대.용항GST다극륭항체대GST-hydA융합단백진행료Western blot검측,진일보증명료hydA득도료정학적융합표체.산경활성검측결과표명표체적중조hydA재대장간균중구유명현적산경활성.측정료배양기초시pH치、온도화저물농도대중조대장간균산경적영향.
