实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2012年
8期
607-610
,共4页
付红敏%李利%汤春辉%皇甫春荣%米弘瑛%李献珍%方芳%许峰
付紅敏%李利%湯春輝%皇甫春榮%米弘瑛%李獻珍%方芳%許峰
부홍민%리리%탕춘휘%황보춘영%미홍영%리헌진%방방%허봉
肺泡Ⅱ型上皮细胞%细胞外信号调节激酶%降钙素基因相关肽%高体积分数氧
肺泡Ⅱ型上皮細胞%細胞外信號調節激酶%降鈣素基因相關肽%高體積分數氧
폐포Ⅱ형상피세포%세포외신호조절격매%강개소기인상관태%고체적분수양
目的 探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高体积分数氧(高氧)暴露下胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞( AECⅡ)氧化损伤的影响,及其作用是否由细胞外信号调节激酶(ERK)所介导.方法 原代分离培养孕21 d胎鼠AECⅡ,培养12 h待细胞贴壁后分为6组:空气组、空气CGRP组、空气CGRP拮抗剂组、高氧组、高氧CGRP组、高氧CGRP拮抗剂组.空气组和高氧组分别在氧体积分数为210 mL·L-1的空气或850 mL·L-1的氧气中培养18 h.CGRP组和CGRP拮抗剂组分别在空气或高氧暴露前加入CGRP或同时加入CGRP和其受体拮抗剂CGRPS-37,终浓度分别为10-8 mol·L-1和10-7 mol·L-1.用免疫比浊法测定培养液LDH、AKP和丙二醛(MDA)水平,流式细胞术测定细胞内活性氧(RoS)水平,荧光显微镜检测胞质表面活性蛋白C(SP-C)的表达情况,Western blot检测磷酸化ERK1,2(p-ERK1/2)的表达水平.结果 高氧组MDA、LDH、AKP、ROS及p-ERK1/2水平均明显高于空气组[(2.29±0.10) μmol ·L-1 vs (1.06 ±0.14)μmol·L-1,( 58.79±5.01)U·L-1 vs(25.92±3.68)U·L-1,(24.63±2.92)U·L-1 vs (10.34±1.78)U·L-1,47.74±3.35 vs 25.96±5.04,1.21±0.06 vs 0.45±0.05,Pa＜0.01],而细胞内SP-C表达则明显低于空气组(22.75±3.31 vs 43.50±4.42)；与高氧组及高氧CGRP拮抗剂组比较,高氧CGRP组MDA、LDH、ROS及AKP水平显著降低,而p-ERK1/2及SP-C的表达水平则明显增高(Pa＜0.01).空气组、空气CGRP组、空气CGRP拮抗剂组组间MDA、LDH、ROS、AKP及SP-C表达水平比较差异均无统计学意义；空气CGRP组p-ERK1/2表达水平明显高于空气组及空气CGRP拮抗剂组(Pa＜0.01).结论 CGRP可减轻高氧对AECⅡ的氧化损伤,其作用机制可能是通过ERK的活化来介导.
目的 探討降鈣素基因相關肽(CGRP)對高體積分數氧(高氧)暴露下胎鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞( AECⅡ)氧化損傷的影響,及其作用是否由細胞外信號調節激酶(ERK)所介導.方法 原代分離培養孕21 d胎鼠AECⅡ,培養12 h待細胞貼壁後分為6組:空氣組、空氣CGRP組、空氣CGRP拮抗劑組、高氧組、高氧CGRP組、高氧CGRP拮抗劑組.空氣組和高氧組分彆在氧體積分數為210 mL·L-1的空氣或850 mL·L-1的氧氣中培養18 h.CGRP組和CGRP拮抗劑組分彆在空氣或高氧暴露前加入CGRP或同時加入CGRP和其受體拮抗劑CGRPS-37,終濃度分彆為10-8 mol·L-1和10-7 mol·L-1.用免疫比濁法測定培養液LDH、AKP和丙二醛(MDA)水平,流式細胞術測定細胞內活性氧(RoS)水平,熒光顯微鏡檢測胞質錶麵活性蛋白C(SP-C)的錶達情況,Western blot檢測燐痠化ERK1,2(p-ERK1/2)的錶達水平.結果 高氧組MDA、LDH、AKP、ROS及p-ERK1/2水平均明顯高于空氣組[(2.29±0.10) μmol ·L-1 vs (1.06 ±0.14)μmol·L-1,( 58.79±5.01)U·L-1 vs(25.92±3.68)U·L-1,(24.63±2.92)U·L-1 vs (10.34±1.78)U·L-1,47.74±3.35 vs 25.96±5.04,1.21±0.06 vs 0.45±0.05,Pa＜0.01],而細胞內SP-C錶達則明顯低于空氣組(22.75±3.31 vs 43.50±4.42)；與高氧組及高氧CGRP拮抗劑組比較,高氧CGRP組MDA、LDH、ROS及AKP水平顯著降低,而p-ERK1/2及SP-C的錶達水平則明顯增高(Pa＜0.01).空氣組、空氣CGRP組、空氣CGRP拮抗劑組組間MDA、LDH、ROS、AKP及SP-C錶達水平比較差異均無統計學意義；空氣CGRP組p-ERK1/2錶達水平明顯高于空氣組及空氣CGRP拮抗劑組(Pa＜0.01).結論 CGRP可減輕高氧對AECⅡ的氧化損傷,其作用機製可能是通過ERK的活化來介導.
목적 탐토강개소기인상관태(CGRP)대고체적분수양(고양)폭로하태서폐포Ⅱ형상피세포( AECⅡ)양화손상적영향,급기작용시부유세포외신호조절격매(ERK)소개도.방법 원대분리배양잉21 d태서AECⅡ,배양12 h대세포첩벽후분위6조:공기조、공기CGRP조、공기CGRP길항제조、고양조、고양CGRP조、고양CGRP길항제조.공기조화고양조분별재양체적분수위210 mL·L-1적공기혹850 mL·L-1적양기중배양18 h.CGRP조화CGRP길항제조분별재공기혹고양폭로전가입CGRP혹동시가입CGRP화기수체길항제CGRPS-37,종농도분별위10-8 mol·L-1화10-7 mol·L-1.용면역비탁법측정배양액LDH、AKP화병이철(MDA)수평,류식세포술측정세포내활성양(RoS)수평,형광현미경검측포질표면활성단백C(SP-C)적표체정황,Western blot검측린산화ERK1,2(p-ERK1/2)적표체수평.결과 고양조MDA、LDH、AKP、ROS급p-ERK1/2수평균명현고우공기조[(2.29±0.10) μmol ·L-1 vs (1.06 ±0.14)μmol·L-1,( 58.79±5.01)U·L-1 vs(25.92±3.68)U·L-1,(24.63±2.92)U·L-1 vs (10.34±1.78)U·L-1,47.74±3.35 vs 25.96±5.04,1.21±0.06 vs 0.45±0.05,Pa＜0.01],이세포내SP-C표체칙명현저우공기조(22.75±3.31 vs 43.50±4.42)；여고양조급고양CGRP길항제조비교,고양CGRP조MDA、LDH、ROS급AKP수평현저강저,이p-ERK1/2급SP-C적표체수평칙명현증고(Pa＜0.01).공기조、공기CGRP조、공기CGRP길항제조조간MDA、LDH、ROS、AKP급SP-C표체수평비교차이균무통계학의의；공기CGRP조p-ERK1/2표체수평명현고우공기조급공기CGRP길항제조(Pa＜0.01).결론 CGRP가감경고양대AECⅡ적양화손상,기작용궤제가능시통과ERK적활화래개도.
