中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2007年
17期
1207-1210
,共4页
张晶虹%孙成林%段志泉%辛世杰
張晶虹%孫成林%段誌泉%辛世傑
장정홍%손성림%단지천%신세걸
腺病毒科%移植%静脉%血管细胞黏附分子-1%细胞黏附
腺病毒科%移植%靜脈%血管細胞黏附分子-1%細胞黏附
선병독과%이식%정맥%혈관세포점부분자-1%세포점부
目的 探讨腺病毒载体转染后对大鼠移植静脉的影响.方法 选用Wistar大鼠间置移植颈静脉于同侧颈总动脉,术后移植静脉行HE染色和VG染色,观测血管内膜厚度.应用免疫组织化学染色,观察血管内膜平滑肌细胞(SMC)内增殖细胞核抗原(PCNA)表达及增殖情况.于倒置荧光显微镜,以紫外光激发观察测定腺病毒转染率.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western蛋白印迹检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平.结果 术后3 d,GFP表达较高;术后10 d,GFP表达有所下降;术后30 d,GFP几乎没有表达.移植术后10 d试验组及对照组可见明显内膜增生.移植术后30 d试验组及对照组内膜增生减轻.试验组及对照组与正常非移植静脉相比,内膜增生明显(P<0.05),试验组较对照组内膜增生稍明显,但差异无统计学意义.实验中正常静脉平滑肌细胞PCNA阳性细胞极少,对照组与试验组术后10 d,内膜与中膜SMC的PCNA阳性细胞增多,增殖达到高峰.术后30 d中膜SMC的PCNA阳性细胞明显减少.试验组及对照组与正常非移植静脉相比,PCNA阳性细胞增高明显(P<0.05).试验组较对照组PCNA阳性细胞稍多,但差异无统计学意义.正常静脉ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白表达很少,对照组移植后3 d部分细胞即出现阳性表达,10 d表达最强,30 d仍较高.与正常静脉组比较,差异有统计学意义(P<0.05).试验组较对照组表达更高,但与对照组比较,差异无统计学意义.结论 腺病毒载体能高效地进行体内基因转移,作用时间短暂.腺病毒载体促进移植静脉的血管内SMC活化、增多、血管内膜增生、ICAM-1、VCAM-1的表达的增加,腺病毒转染到移植静脉血管壁后产生炎症、内膜增生等效果,混淆了目的基因的效果.
目的 探討腺病毒載體轉染後對大鼠移植靜脈的影響.方法 選用Wistar大鼠間置移植頸靜脈于同側頸總動脈,術後移植靜脈行HE染色和VG染色,觀測血管內膜厚度.應用免疫組織化學染色,觀察血管內膜平滑肌細胞(SMC)內增殖細胞覈抗原(PCNA)錶達及增殖情況.于倒置熒光顯微鏡,以紫外光激髮觀察測定腺病毒轉染率.逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)及Western蛋白印跡檢測細胞間黏附分子-1(ICAM-1)、血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)水平.結果 術後3 d,GFP錶達較高;術後10 d,GFP錶達有所下降;術後30 d,GFP幾乎沒有錶達.移植術後10 d試驗組及對照組可見明顯內膜增生.移植術後30 d試驗組及對照組內膜增生減輕.試驗組及對照組與正常非移植靜脈相比,內膜增生明顯(P<0.05),試驗組較對照組內膜增生稍明顯,但差異無統計學意義.實驗中正常靜脈平滑肌細胞PCNA暘性細胞極少,對照組與試驗組術後10 d,內膜與中膜SMC的PCNA暘性細胞增多,增殖達到高峰.術後30 d中膜SMC的PCNA暘性細胞明顯減少.試驗組及對照組與正常非移植靜脈相比,PCNA暘性細胞增高明顯(P<0.05).試驗組較對照組PCNA暘性細胞稍多,但差異無統計學意義.正常靜脈ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白錶達很少,對照組移植後3 d部分細胞即齣現暘性錶達,10 d錶達最彊,30 d仍較高.與正常靜脈組比較,差異有統計學意義(P<0.05).試驗組較對照組錶達更高,但與對照組比較,差異無統計學意義.結論 腺病毒載體能高效地進行體內基因轉移,作用時間短暫.腺病毒載體促進移植靜脈的血管內SMC活化、增多、血管內膜增生、ICAM-1、VCAM-1的錶達的增加,腺病毒轉染到移植靜脈血管壁後產生炎癥、內膜增生等效果,混淆瞭目的基因的效果.
목적 탐토선병독재체전염후대대서이식정맥적영향.방법 선용Wistar대서간치이식경정맥우동측경총동맥,술후이식정맥행HE염색화VG염색,관측혈관내막후도.응용면역조직화학염색,관찰혈관내막평활기세포(SMC)내증식세포핵항원(PCNA)표체급증식정황.우도치형광현미경,이자외광격발관찰측정선병독전염솔.역전록취합매련반응(RT-PCR)급Western단백인적검측세포간점부분자-1(ICAM-1)、혈관세포점부분자-1(VCAM-1)수평.결과 술후3 d,GFP표체교고;술후10 d,GFP표체유소하강;술후30 d,GFP궤호몰유표체.이식술후10 d시험조급대조조가견명현내막증생.이식술후30 d시험조급대조조내막증생감경.시험조급대조조여정상비이식정맥상비,내막증생명현(P<0.05),시험조교대조조내막증생초명현,단차이무통계학의의.실험중정상정맥평활기세포PCNA양성세포겁소,대조조여시험조술후10 d,내막여중막SMC적PCNA양성세포증다,증식체도고봉.술후30 d중막SMC적PCNA양성세포명현감소.시험조급대조조여정상비이식정맥상비,PCNA양성세포증고명현(P<0.05).시험조교대조조PCNA양성세포초다,단차이무통계학의의.정상정맥ICAM-1、VCAM-1적mRNA화단백표체흔소,대조조이식후3 d부분세포즉출현양성표체,10 d표체최강,30 d잉교고.여정상정맥조비교,차이유통계학의의(P<0.05).시험조교대조조표체경고,단여대조조비교,차이무통계학의의.결론 선병독재체능고효지진행체내기인전이,작용시간단잠.선병독재체촉진이식정맥적혈관내SMC활화、증다、혈관내막증생、ICAM-1、VCAM-1적표체적증가,선병독전염도이식정맥혈관벽후산생염증、내막증생등효과,혼효료목적기인적효과.