微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2003年
5期
586-591
,共6页
汤晓颖%秦俊川%唐国敏%王敖全
湯曉穎%秦俊川%唐國敏%王敖全
탕효영%진준천%당국민%왕오전
β-内切葡聚糖酶%整合表达%双功能啤酒酵母
β-內切葡聚糖酶%整閤錶達%雙功能啤酒酵母
β-내절포취당매%정합표체%쌍공능비주효모
用PCR合成的瑞氏木霉(T.reesei)β-内切葡聚糖酶Ⅰ(EGⅠ)的cDNA, 构建了由酵母醇脱氢酶 (ADH1)启动子和终止子引导表达、β-内切葡聚糖酶自身信号肽序列引导分泌、由酵母rDNA序列引导同源整合的酵母YIP型β-内切葡聚糖酶表达分泌质粒pA15-PET.采用pA15-PET与酵母YEP型G418抗性表达质粒的共转化,将EGⅠ表达单元整合到已整合有α-乙酰乳酸脱羧酶(α-ALDC)表达单元的啤酒酵母工程菌BE9711的染色体rDNA序列中,获得同时表达胞内α-ALDC和胞外β-内切葡聚糖酶的啤酒酵母工程菌.
用PCR閤成的瑞氏木黴(T.reesei)β-內切葡聚糖酶Ⅰ(EGⅠ)的cDNA, 構建瞭由酵母醇脫氫酶 (ADH1)啟動子和終止子引導錶達、β-內切葡聚糖酶自身信號肽序列引導分泌、由酵母rDNA序列引導同源整閤的酵母YIP型β-內切葡聚糖酶錶達分泌質粒pA15-PET.採用pA15-PET與酵母YEP型G418抗性錶達質粒的共轉化,將EGⅠ錶達單元整閤到已整閤有α-乙酰乳痠脫羧酶(α-ALDC)錶達單元的啤酒酵母工程菌BE9711的染色體rDNA序列中,穫得同時錶達胞內α-ALDC和胞外β-內切葡聚糖酶的啤酒酵母工程菌.
용PCR합성적서씨목매(T.reesei)β-내절포취당매Ⅰ(EGⅠ)적cDNA, 구건료유효모순탈경매 (ADH1)계동자화종지자인도표체、β-내절포취당매자신신호태서렬인도분비、유효모rDNA서렬인도동원정합적효모YIP형β-내절포취당매표체분비질립pA15-PET.채용pA15-PET여효모YEP형G418항성표체질립적공전화,장EGⅠ표체단원정합도이정합유α-을선유산탈최매(α-ALDC)표체단원적비주효모공정균BE9711적염색체rDNA서렬중,획득동시표체포내α-ALDC화포외β-내절포취당매적비주효모공정균.