军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2004年
1期
25-27,67
,共4页
王金凤%徐东刚%彭善云%蔡欣%邹民吉%王嘉玺
王金鳳%徐東剛%彭善雲%蔡訢%鄒民吉%王嘉璽
왕금봉%서동강%팽선운%채흔%추민길%왕가새
角质细胞生长因子-2%基因克隆%基因表达%大肠杆菌
角質細胞生長因子-2%基因剋隆%基因錶達%大腸桿菌
각질세포생장인자-2%기인극륭%기인표체%대장간균
目的:克隆人KGF-2基因,并在大肠杆菌中进行表达.方法:通过PCR扩增,从人胎肝cDNA文库中获得编码人KGF-2的cDNA,并将其分别克隆入pBV220,pLEX和pGEX4T-1质粒中,研究其在不同表达质粒和大肠杆菌中的表达情况.结果:克隆得到的KGF-2 cDNA经测序证明与文献报道的序列一致.将其克隆于pBV220质粒中,在E.coli JM109中表达量相对最高,约占菌体总蛋白的4%;克隆于pLEX质粒中,在E.coli GI724中的表达量约占全菌总蛋白的5%;克隆于pGEX4T-1中,在E.coli JM109中的表达量可占到全菌总蛋白的20%.结论:采用GST 融合蛋白表达质粒pGEX4T-1对KGF-2进行表达,较pBV220和pLEX具有明显优势,能实现对KGF-2的高效表达,为进一步的功能研究奠定了基础.
目的:剋隆人KGF-2基因,併在大腸桿菌中進行錶達.方法:通過PCR擴增,從人胎肝cDNA文庫中穫得編碼人KGF-2的cDNA,併將其分彆剋隆入pBV220,pLEX和pGEX4T-1質粒中,研究其在不同錶達質粒和大腸桿菌中的錶達情況.結果:剋隆得到的KGF-2 cDNA經測序證明與文獻報道的序列一緻.將其剋隆于pBV220質粒中,在E.coli JM109中錶達量相對最高,約佔菌體總蛋白的4%;剋隆于pLEX質粒中,在E.coli GI724中的錶達量約佔全菌總蛋白的5%;剋隆于pGEX4T-1中,在E.coli JM109中的錶達量可佔到全菌總蛋白的20%.結論:採用GST 融閤蛋白錶達質粒pGEX4T-1對KGF-2進行錶達,較pBV220和pLEX具有明顯優勢,能實現對KGF-2的高效錶達,為進一步的功能研究奠定瞭基礎.
목적:극륭인KGF-2기인,병재대장간균중진행표체.방법:통과PCR확증,종인태간cDNA문고중획득편마인KGF-2적cDNA,병장기분별극륭입pBV220,pLEX화pGEX4T-1질립중,연구기재불동표체질립화대장간균중적표체정황.결과:극륭득도적KGF-2 cDNA경측서증명여문헌보도적서렬일치.장기극륭우pBV220질립중,재E.coli JM109중표체량상대최고,약점균체총단백적4%;극륭우pLEX질립중,재E.coli GI724중적표체량약점전균총단백적5%;극륭우pGEX4T-1중,재E.coli JM109중적표체량가점도전균총단백적20%.결론:채용GST 융합단백표체질립pGEX4T-1대KGF-2진행표체,교pBV220화pLEX구유명현우세,능실현대KGF-2적고효표체,위진일보적공능연구전정료기출.
