中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2006年
6期
414-419
,共6页
喻海琼%刘志刚%于琨瑛%许卓谦%丘劲
喻海瓊%劉誌剛%于琨瑛%許卓謙%丘勁
유해경%류지강%우곤영%허탁겸%구경
聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)%屋尘螨%变应原%纳米微粒%过敏性气道炎症%小鼠
聚乳痠-羥基乙痠共聚物(PLGA)%屋塵螨%變應原%納米微粒%過敏性氣道炎癥%小鼠
취유산-간기을산공취물(PLGA)%옥진만%변응원%납미미립%과민성기도염증%소서
目的 观察以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)材料为佐剂制备的重组屋尘螨2类变应原(rDer p 2)纳米微粒疫苗(DEPN)对小鼠过敏性气道炎症的影响,并探讨其免疫治疗机制.方法 制备PLGA-rDer p 2纳米粒子并鉴定其特性.40只BALB/c小鼠随机分为5组,A组(对照组)均给予生理盐水(100 μl).B、C、D和E组腹部皮下注射屋尘螨粗浸液(10 μg)免疫小鼠致敏,然后分别用PBS(100 μl)、2 mg空白PLGA粒子(empty PLGA,EP)、100 μg rDer p 2、2 mg的DEPN纳米疫苗(载有100 μg rDer p 2)皮下注射进行免疫治疗,连续免疫治疗3 d,1次/d,各组用rDer p 2(50 μg)滴鼻激发,激发后第2天剖杀,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并对细胞进行总计数和分类计数;HE染色和PAS染色(Periodic Acid-Schiff Stain)观察小鼠肺部组织炎症和支气管黏液分泌;用ELISA检测BALF和脾细胞培养上清的细胞因子(IL-4、IFN-γ)和血清中变应原特异性IgG2a和IgE抗体浓度.结果 B、C组肺部呈明显的变态反应性炎症,D、E组变应原诱导的肺部嗜酸粒细胞浸润和黏液分泌比B、C组显著减轻.BALF中的细胞总数B组比A组明显增多,分类细胞以中性和嗜酸粒细胞为主,超过50%.rDer p 2特异性IgE抗体水平,D组(0.93±0.04)和E组(0.77±0.10)均低于B组(1.14±0.10)(P＜0.01);特异性IgG2a抗体水平,D组(1.02+0.01)和E组(1.17±0.46)均高于B组(0.14±0.01)(P＜0.01).在BALF中,D组[(55.60±3.79)pg/ml]和E组[(48.60±4.50)pg/ml] IL-4水平均低于B组[(78.90±6.07)pg/ml](P＜0.01);IFN-γ水平E组[(68.50±2.87)pg/ml]显著高于B组[(27.30±3.51)pg/ml](P＜0.01).脾细胞上清的IL-4水平,D组[(56.3±4.85)pg/ml]和E组[(40.2±4.36)pg/ml]显著低于B组[(81.20±6.84)pg/ml](P＜0.01);IFN-γ水平,E组[(70.20±3.85)pg/ml]显著高于B组[(34.60±2.25)pg/ml].结论 DEPN免疫治疗可抑制小鼠肺部过敏炎症,其机制可能与调节Th1/Th2平衡有关.
目的 觀察以聚乳痠-羥基乙痠共聚物(PLGA)材料為佐劑製備的重組屋塵螨2類變應原(rDer p 2)納米微粒疫苗(DEPN)對小鼠過敏性氣道炎癥的影響,併探討其免疫治療機製.方法 製備PLGA-rDer p 2納米粒子併鑒定其特性.40隻BALB/c小鼠隨機分為5組,A組(對照組)均給予生理鹽水(100 μl).B、C、D和E組腹部皮下註射屋塵螨粗浸液(10 μg)免疫小鼠緻敏,然後分彆用PBS(100 μl)、2 mg空白PLGA粒子(empty PLGA,EP)、100 μg rDer p 2、2 mg的DEPN納米疫苗(載有100 μg rDer p 2)皮下註射進行免疫治療,連續免疫治療3 d,1次/d,各組用rDer p 2(50 μg)滴鼻激髮,激髮後第2天剖殺,收集支氣管肺泡灌洗液(BALF)併對細胞進行總計數和分類計數;HE染色和PAS染色(Periodic Acid-Schiff Stain)觀察小鼠肺部組織炎癥和支氣管黏液分泌;用ELISA檢測BALF和脾細胞培養上清的細胞因子(IL-4、IFN-γ)和血清中變應原特異性IgG2a和IgE抗體濃度.結果 B、C組肺部呈明顯的變態反應性炎癥,D、E組變應原誘導的肺部嗜痠粒細胞浸潤和黏液分泌比B、C組顯著減輕.BALF中的細胞總數B組比A組明顯增多,分類細胞以中性和嗜痠粒細胞為主,超過50%.rDer p 2特異性IgE抗體水平,D組(0.93±0.04)和E組(0.77±0.10)均低于B組(1.14±0.10)(P＜0.01);特異性IgG2a抗體水平,D組(1.02+0.01)和E組(1.17±0.46)均高于B組(0.14±0.01)(P＜0.01).在BALF中,D組[(55.60±3.79)pg/ml]和E組[(48.60±4.50)pg/ml] IL-4水平均低于B組[(78.90±6.07)pg/ml](P＜0.01);IFN-γ水平E組[(68.50±2.87)pg/ml]顯著高于B組[(27.30±3.51)pg/ml](P＜0.01).脾細胞上清的IL-4水平,D組[(56.3±4.85)pg/ml]和E組[(40.2±4.36)pg/ml]顯著低于B組[(81.20±6.84)pg/ml](P＜0.01);IFN-γ水平,E組[(70.20±3.85)pg/ml]顯著高于B組[(34.60±2.25)pg/ml].結論 DEPN免疫治療可抑製小鼠肺部過敏炎癥,其機製可能與調節Th1/Th2平衡有關.
목적 관찰이취유산-간기을산공취물(PLGA)재료위좌제제비적중조옥진만2류변응원(rDer p 2)납미미립역묘(DEPN)대소서과민성기도염증적영향,병탐토기면역치료궤제.방법 제비PLGA-rDer p 2납미입자병감정기특성.40지BALB/c소서수궤분위5조,A조(대조조)균급여생리염수(100 μl).B、C、D화E조복부피하주사옥진만조침액(10 μg)면역소서치민,연후분별용PBS(100 μl)、2 mg공백PLGA입자(empty PLGA,EP)、100 μg rDer p 2、2 mg적DEPN납미역묘(재유100 μg rDer p 2)피하주사진행면역치료,련속면역치료3 d,1차/d,각조용rDer p 2(50 μg)적비격발,격발후제2천부살,수집지기관폐포관세액(BALF)병대세포진행총계수화분류계수;HE염색화PAS염색(Periodic Acid-Schiff Stain)관찰소서폐부조직염증화지기관점액분비;용ELISA검측BALF화비세포배양상청적세포인자(IL-4、IFN-γ)화혈청중변응원특이성IgG2a화IgE항체농도.결과 B、C조폐부정명현적변태반응성염증,D、E조변응원유도적폐부기산립세포침윤화점액분비비B、C조현저감경.BALF중적세포총수B조비A조명현증다,분류세포이중성화기산립세포위주,초과50%.rDer p 2특이성IgE항체수평,D조(0.93±0.04)화E조(0.77±0.10)균저우B조(1.14±0.10)(P＜0.01);특이성IgG2a항체수평,D조(1.02+0.01)화E조(1.17±0.46)균고우B조(0.14±0.01)(P＜0.01).재BALF중,D조[(55.60±3.79)pg/ml]화E조[(48.60±4.50)pg/ml] IL-4수평균저우B조[(78.90±6.07)pg/ml](P＜0.01);IFN-γ수평E조[(68.50±2.87)pg/ml]현저고우B조[(27.30±3.51)pg/ml](P＜0.01).비세포상청적IL-4수평,D조[(56.3±4.85)pg/ml]화E조[(40.2±4.36)pg/ml]현저저우B조[(81.20±6.84)pg/ml](P＜0.01);IFN-γ수평,E조[(70.20±3.85)pg/ml]현저고우B조[(34.60±2.25)pg/ml].결론 DEPN면역치료가억제소서폐부과민염증,기궤제가능여조절Th1/Th2평형유관.
