新乡医学院学报
新鄉醫學院學報
신향의학원학보
JOURNAL OF XINXIANG MEDICAL COLLEGE
2006年
6期
564-568
,共5页
冯慧%伊德林%曾艳%刘芙蓉%方瑾%宋今丹
馮慧%伊德林%曾豔%劉芙蓉%方瑾%宋今丹
풍혜%이덕림%증염%류부용%방근%송금단
亲和层析%纯化%肿瘤相关抗原
親和層析%純化%腫瘤相關抗原
친화층석%순화%종류상관항원
目的 制备和纯化鼠源性抗人大肠肿瘤单克隆抗体(单抗),分析其相应抗原在大肠肿瘤细胞中的表达.方法 常规方法免疫BALB/c小鼠制备腹水,应用G蛋白亲和层析柱对小鼠腹水样品进行分离纯化.采用SDS-PAGE、间接免疫荧光(IFA)、间接ELISA检测纯化后抗体的纯度、活性、效价和特异性.用免疫细胞化学、流式细胞术和免疫组织化学技术S-P法检测其相应抗原在大肠肿瘤细胞株和组织中的表达.结果 还原性SDS-PAGE显示所获抗体为单一组分.应用间接ELISA检测抗体效价为1:106,纯化后的抗体对大肠肿瘤细胞株具有特异结合活性,并在高分化大肠腺癌组织中表现出更高选择性(P＜0.01).结论 G蛋白亲和层析法操作简便,所得单抗的纯度高,特异性强,生物学活性好.对临床上早期诊断大肠肿瘤将具有较大的意义.
目的 製備和純化鼠源性抗人大腸腫瘤單剋隆抗體(單抗),分析其相應抗原在大腸腫瘤細胞中的錶達.方法 常規方法免疫BALB/c小鼠製備腹水,應用G蛋白親和層析柱對小鼠腹水樣品進行分離純化.採用SDS-PAGE、間接免疫熒光(IFA)、間接ELISA檢測純化後抗體的純度、活性、效價和特異性.用免疫細胞化學、流式細胞術和免疫組織化學技術S-P法檢測其相應抗原在大腸腫瘤細胞株和組織中的錶達.結果 還原性SDS-PAGE顯示所穫抗體為單一組分.應用間接ELISA檢測抗體效價為1:106,純化後的抗體對大腸腫瘤細胞株具有特異結閤活性,併在高分化大腸腺癌組織中錶現齣更高選擇性(P＜0.01).結論 G蛋白親和層析法操作簡便,所得單抗的純度高,特異性彊,生物學活性好.對臨床上早期診斷大腸腫瘤將具有較大的意義.
목적 제비화순화서원성항인대장종류단극륭항체(단항),분석기상응항원재대장종류세포중적표체.방법 상규방법면역BALB/c소서제비복수,응용G단백친화층석주대소서복수양품진행분리순화.채용SDS-PAGE、간접면역형광(IFA)、간접ELISA검측순화후항체적순도、활성、효개화특이성.용면역세포화학、류식세포술화면역조직화학기술S-P법검측기상응항원재대장종류세포주화조직중적표체.결과 환원성SDS-PAGE현시소획항체위단일조분.응용간접ELISA검측항체효개위1:106,순화후적항체대대장종류세포주구유특이결합활성,병재고분화대장선암조직중표현출경고선택성(P＜0.01).결론 G단백친화층석법조작간편,소득단항적순도고,특이성강,생물학활성호.대림상상조기진단대장종류장구유교대적의의.
