CAJ | 학술논문

背景:国内外许多研究通过不同的构建方法构建组织工程化软骨支架复合体修复骨软骨联合缺损,且取得了一定的进展,但目前各种方法存在的问题突出表现为组织工程化的软骨和骨组织之间的界面、移植体和宿丰骨和软骨之间的界面耦合不够理想.目的:将体外提纯、扩增的骨髓间充质下细胞诱导成软骨细胞.将其接种于穿"靴"的纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架的底部上联合培养,探索其用于组织工程软骨复合体的可行性.设计、时间及地点:细胞和材料复合的体外观察实验,于2008-03/07在暨南大学附属第一医院中心实验室和暨南大学理工学院材料系实验室完成.材聿斗:通过原位复合和冷冻干燥结合的方法制各纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架.健康新西兰兔10只由广东省医学实验动物中心提供.方法:密度梯度离心法提取分离骨髓间充质干细胞,软骨诱导液诱导骨髓闻充质干细胞2周后甲苯胺蓝染色检测.把诱导得到的软骨细胞接种于穿"靴"的纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架的底部,将细胞-支架复合物置入成软骨条件培养液中培养2周.主要观察指标:倒置相差显微镜下观察细胞形态特征,鉴定CD29,CD44,CD34和CD45抗原的表达,观察细胞生长特性,测定细胞活力和生长周期,扫描电镜观察纳米羟摹磷灰石/壳聚糖史架结构和细胞与支架的复合情况.结果:骨髓间充质干细胞可在体外分离扩增,表达CD29和CD44,不表达CD34和CD45,细胞活力为95.27%,G0～G1期细胞占94.68%.经软骨诱导液诱导后骨髓问充质十细胞转化成软骨细胞;制备的纳米羟基磷灰石/壳聚糖多孔支架孔隙率为90%,平均孔径为150μm,与软骨细胞有较好的黏附性.结论:初步证实纳米羟基磷灰石,壳聚糖支架与骨髓间充质干细胞诱导成的软骨细胞复合可以在体外构建组织工程软骨复合体.
배경:국내외허다연구통과불동적구건방법구건조직공정화연골지가복합체수복골연골연합결손,차취득료일정적진전,단목전각충방법존재적문제돌출표현위조직공정화적연골화골조직지간적계면、이식체화숙봉골화연골지간적계면우합불구이상.목적:장체외제순、확증적골수간충질하세포유도성연골세포.장기접충우천"화"적납미간기린회석/각취당지가적저부상연합배양,탐색기용우조직공정연골복합체적가행성.설계、시간급지점:세포화재료복합적체외관찰실험,우2008-03/07재기남대학부속제일의원중심실험실화기남대학리공학원재료계실험실완성.재율두:통과원위복합화냉동간조결합적방법제각납미간기린회석/각취당지가.건강신서란토10지유광동성의학실험동물중심제공.방법:밀도제도리심법제취분리골수간충질간세포,연골유도액유도골수문충질간세포2주후갑분알람염색검측.파유도득도적연골세포접충우천"화"적납미간기린회석/각취당지가적저부,장세포-지가복합물치입성연골조건배양액중배양2주.주요관찰지표:도치상차현미경하관찰세포형태특정,감정CD29,CD44,CD34화CD45항원적표체,관찰세포생장특성,측정세포활력화생장주기,소묘전경관찰납미간모린회석/각취당사가결구화세포여지가적복합정황.결과:골수간충질간세포가재체외분리확증,표체CD29화CD44,불표체CD34화CD45,세포활력위95.27%,G0～G1기세포점94.68%.경연골유도액유도후골수문충질십세포전화성연골세포;제비적납미간기린회석/각취당다공지가공극솔위90%,평균공경위150μm,여연골세포유교호적점부성.결론:초보증실납미간기린회석,각취당지가여골수간충질간세포유도성적연골세포복합가이재체외구건조직공정연골복합체.