CAJ | 학술논문

[目的]建立栝楼的RAPD-PCR体系并对该体系进行优化.[方法]以栝楼叶片为材料,采用CTAB法提取栝楼叶片基因组DNA,利用正交设计对RAPD-PCR体系进行优化.[结果]各因素水平变化对PCR反应影响大小依次为:Mg2+、TaqDNA聚合酶、引物和dNTPs.通过试验分析,优化的栝楼RAPD反应体系为:在25 μl反应体系中,含10×buffer 2.5 μl,Mg2+ 2.0 mmol/L,Taq酶1 U,引物0 8 μmol/L,dNTPs 0.1 mmol/L.反应程序为94 ℃预变性2 mim;94 ℃变性30 s,37 ℃退火温度40 s,72 ℃延伸1.5 mim,36次循环;72 ℃延伸10 mim,4 ℃保存.[结论]该研究建立的栝楼RAPD反应体系稳定可靠,为栝楼性别鉴定、遗传多样性分析、亲缘关系分析等方面的研究提供了有效的方法.
[목적]건립괄루적RAPD-PCR체계병대해체계진행우화.[방법]이괄루협편위재료,채용CTAB법제취괄루협편기인조DNA,이용정교설계대RAPD-PCR체계진행우화.[결과]각인소수평변화대PCR반응영향대소의차위:Mg2+、TaqDNA취합매、인물화dNTPs.통과시험분석,우화적괄루RAPD반응체계위:재25 μl반응체계중,함10×buffer 2.5 μl,Mg2+ 2.0 mmol/L,Taq매1 U,인물0 8 μmol/L,dNTPs 0.1 mmol/L.반응정서위94 ℃예변성2 mim;94 ℃변성30 s,37 ℃퇴화온도40 s,72 ℃연신1.5 mim,36차순배;72 ℃연신10 mim,4 ℃보존.[결론]해연구건립적괄루RAPD반응체계은정가고,위괄루성별감정、유전다양성분석、친연관계분석등방면적연구제공료유효적방법.