东北林业大学学报
東北林業大學學報
동북임업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY
2011年
5期
126-128
,共3页
陈凤毛%叶建仁%吴小芹%郝德君
陳鳳毛%葉建仁%吳小芹%郝德君
진봉모%협건인%오소근%학덕군
松材线虫%非放射性探针%核酸斑点杂交%地高辛探针
鬆材線蟲%非放射性探針%覈痠斑點雜交%地高辛探針
송재선충%비방사성탐침%핵산반점잡교%지고신탐침
选用松材线虫特异引物对M03F2/R1(Fl:5'-CGGGT CATGG CTGGA GGTAT CGT-3',R1:5'-TCGCT CAATG GCAAA TTCTT CGTA-3'),以Dig-11-dUTP代替部分dTTP,采用PCR技术,直接扩增松材线虫特异片段作为松材线虫地高辛探针.结果表明,地高辛探针长度一致,为600bp.产量较高,探针质量浓度达280 mg/L.采用探针DIG-F2/R1对线虫基因组DNA进行点杂交,19个松材线虫株系均表现有较强的杂交信号,而8个拟松材线虫、1个霍夫曼尼伞滑刃线虫、1个大核滑刃线虫、1个长尾属线虫均无杂交信号.且用该探针可以稳定地检测出单条松材线虫.因此,该探针特异性强,灵敏度高.该探针及其配套的杂交检测技术可以用于检测线虫样本中是否含有松材线虫.
選用鬆材線蟲特異引物對M03F2/R1(Fl:5'-CGGGT CATGG CTGGA GGTAT CGT-3',R1:5'-TCGCT CAATG GCAAA TTCTT CGTA-3'),以Dig-11-dUTP代替部分dTTP,採用PCR技術,直接擴增鬆材線蟲特異片段作為鬆材線蟲地高辛探針.結果錶明,地高辛探針長度一緻,為600bp.產量較高,探針質量濃度達280 mg/L.採用探針DIG-F2/R1對線蟲基因組DNA進行點雜交,19箇鬆材線蟲株繫均錶現有較彊的雜交信號,而8箇擬鬆材線蟲、1箇霍伕曼尼傘滑刃線蟲、1箇大覈滑刃線蟲、1箇長尾屬線蟲均無雜交信號.且用該探針可以穩定地檢測齣單條鬆材線蟲.因此,該探針特異性彊,靈敏度高.該探針及其配套的雜交檢測技術可以用于檢測線蟲樣本中是否含有鬆材線蟲.
선용송재선충특이인물대M03F2/R1(Fl:5'-CGGGT CATGG CTGGA GGTAT CGT-3',R1:5'-TCGCT CAATG GCAAA TTCTT CGTA-3'),이Dig-11-dUTP대체부분dTTP,채용PCR기술,직접확증송재선충특이편단작위송재선충지고신탐침.결과표명,지고신탐침장도일치,위600bp.산량교고,탐침질량농도체280 mg/L.채용탐침DIG-F2/R1대선충기인조DNA진행점잡교,19개송재선충주계균표현유교강적잡교신호,이8개의송재선충、1개곽부만니산활인선충、1개대핵활인선충、1개장미속선충균무잡교신호.차용해탐침가이은정지검측출단조송재선충.인차,해탐침특이성강,령민도고.해탐침급기배투적잡교검측기술가이용우검측선충양본중시부함유송재선충.
