CAJ | 학술논문

以普那菊苣(Cichorium intybus L.cv.Puna)叶片为试验材料,接种于含不同激素浓度配比的MS培养基上进行愈伤组织、芽分化以及根再生的诱导,分析了不同激素浓度及其配比对愈伤组织诱导和芽分化以及根再生效果的影响.以已经建立的再生体系为基础,以农杆菌菌株LBA4404(含质粒pBin438- TaNHX2)侵染转化普那菊苣,探索普那菊苣高效遗传转化体系.结果表明:对外植体适宜的预培养时间为2～3 d,与农杆菌的共培养时间也应控制在2～3 d；侵染时间控制在8 min左右；卡那霉素(Km)阳性筛选的适宜选择浓度为60mg·L-1.乙酰丁香酮(AS)200 μmol·L-1是促进农杆菌转化的最佳浓度,200 W超声波处理、20次负压处理也可提高农杆菌转化率效果.26 mg·L- 1 Km是野生型普那菊苣苗能够存活的上限,头孢唑林钠和头孢噻肟钠在500～1000 nmg·L-1浓度范围内、羧苄青霉素300 mg·L-1和氨苄青霉素在40～60 mg·L-1浓度范围内均能较好的诱导出愈伤组织和芽.将来自小麦(Triticum aestivum)的Na+/H+逆向转运蛋白(vacuolar Na+/H+ exchanger or antiporter,简称NHX,NHE或NHA)导入普那菊苣；经抗生素筛选以及针对TaNHX2基因的PCR检测和Southern杂交分析,证明获得了28株转TaNHX2基因的普那菊苣植株.
이보나국거(Cichorium intybus L.cv.Puna)협편위시험재료,접충우함불동격소농도배비적MS배양기상진행유상조직、아분화이급근재생적유도,분석료불동격소농도급기배비대유상조직유도화아분화이급근재생효과적영향.이이경건립적재생체계위기출,이농간균균주LBA4404(함질립pBin438- TaNHX2)침염전화보나국거,탐색보나국거고효유전전화체계.결과표명:대외식체괄의적예배양시간위2～3 d,여농간균적공배양시간야응공제재2～3 d；침염시간공제재8 min좌우；잡나매소(Km)양성사선적괄의선택농도위60mg·L-1.을선정향동(AS)200 μmol·L-1시촉진농간균전화적최가농도,200 W초성파처리、20차부압처리야가제고농간균전화솔효과.26 mg·L- 1 Km시야생형보나국거묘능구존활적상한,두포서림납화두포새우납재500～1000 nmg·L-1농도범위내、최변청매소300 mg·L-1화안변청매소재40～60 mg·L-1농도범위내균능교호적유도출유상조직화아.장래자소맥(Triticum aestivum)적Na+/H+역향전운단백(vacuolar Na+/H+ exchanger or antiporter,간칭NHX,NHE혹NHA)도입보나국거；경항생소사선이급침대TaNHX2기인적PCR검측화Southern잡교분석,증명획득료28주전TaNHX2기인적보나국거식주.