中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2012年
3期
238-240
,共3页
李建军%胡明明%朱晓凯%李艳玲%张艳禾%谢芳%王春来
李建軍%鬍明明%硃曉凱%李豔玲%張豔禾%謝芳%王春來
리건군%호명명%주효개%리염령%장염화%사방%왕춘래
副猪嗜血杆菌%tbpA基因%原核表达
副豬嗜血桿菌%tbpA基因%原覈錶達
부저기혈간균%tbpA기인%원핵표체
为原核表达副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白,本研究利用特异性引物扩增tbpA基因,并将其克隆到pMD 18-T载体中进行序列测定.再将其亚克隆于pET-28a中构建重组表达质粒pET-tbpA.将其转化受体菌E.coli BL21 (DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约106 ku,并以包涵体形式存在.表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清抗体效价在1∶3 200以上,表明TbpA具有良好的免疫原性.
為原覈錶達副豬嗜血桿菌血清5型TbpA蛋白,本研究利用特異性引物擴增tbpA基因,併將其剋隆到pMD 18-T載體中進行序列測定.再將其亞剋隆于pET-28a中構建重組錶達質粒pET-tbpA.將其轉化受體菌E.coli BL21 (DE3),經IPTG誘導後,SDS-PAGE電泳和western blot分析錶明,錶達的重組蛋白約106 ku,併以包涵體形式存在.錶達的重組蛋白經純化後,免疫6週齡昆明小鼠製備免疫血清,ELISA分析錶明製備的血清抗體效價在1∶3 200以上,錶明TbpA具有良好的免疫原性.
위원핵표체부저기혈간균혈청5형TbpA단백,본연구이용특이성인물확증tbpA기인,병장기극륭도pMD 18-T재체중진행서렬측정.재장기아극륭우pET-28a중구건중조표체질립pET-tbpA.장기전화수체균E.coli BL21 (DE3),경IPTG유도후,SDS-PAGE전영화western blot분석표명,표체적중조단백약106 ku,병이포함체형식존재.표체적중조단백경순화후,면역6주령곤명소서제비면역혈청,ELISA분석표명제비적혈청항체효개재1∶3 200이상,표명TbpA구유량호적면역원성.
