生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
7期
119-125
,共7页
王凤寰%孟青青%封棣%杨建国%汪兵
王鳳寰%孟青青%封棣%楊建國%汪兵
왕봉환%맹청청%봉체%양건국%왕병
黑曲霉%硫磺矿硫化叶菌%嗜热糖化酶%同源重组%热稳定性
黑麯黴%硫磺礦硫化葉菌%嗜熱糖化酶%同源重組%熱穩定性
흑곡매%류광광류화협균%기열당화매%동원중조%열은정성
为了提高糖化酶的耐热性能,降低淀粉糖化发酵工艺的生产成本,构建了同源整合载体pEasy-glaAdir以及pEasyssg,将黑曲霉(Aspergillus niger)的糖化酶基因(glaA)灭活,并将硫磺矿硫化叶菌(Sulfolobus solfataricus)的嗜热糖化酶基因(ssg)插入到黑曲霉基因组中,筛选得到表达嗜热糖化酶的重组黑曲霉工程菌(A.niger WWI).重组菌的发酵结果显示,嗜热糖化酶在黑曲霉中得到了分泌表达,发酵液酶活达到3 030 U/mL.重组嗜热糖化酶的最适反应温度为90℃,最适pH为6.0,该酶具有较高的热稳定性,在80℃时的半衰期在60 min以上,具有良好的工业应用前景.
為瞭提高糖化酶的耐熱性能,降低澱粉糖化髮酵工藝的生產成本,構建瞭同源整閤載體pEasy-glaAdir以及pEasyssg,將黑麯黴(Aspergillus niger)的糖化酶基因(glaA)滅活,併將硫磺礦硫化葉菌(Sulfolobus solfataricus)的嗜熱糖化酶基因(ssg)插入到黑麯黴基因組中,篩選得到錶達嗜熱糖化酶的重組黑麯黴工程菌(A.niger WWI).重組菌的髮酵結果顯示,嗜熱糖化酶在黑麯黴中得到瞭分泌錶達,髮酵液酶活達到3 030 U/mL.重組嗜熱糖化酶的最適反應溫度為90℃,最適pH為6.0,該酶具有較高的熱穩定性,在80℃時的半衰期在60 min以上,具有良好的工業應用前景.
위료제고당화매적내열성능,강저정분당화발효공예적생산성본,구건료동원정합재체pEasy-glaAdir이급pEasyssg,장흑곡매(Aspergillus niger)적당화매기인(glaA)멸활,병장류광광류화협균(Sulfolobus solfataricus)적기열당화매기인(ssg)삽입도흑곡매기인조중,사선득도표체기열당화매적중조흑곡매공정균(A.niger WWI).중조균적발효결과현시,기열당화매재흑곡매중득도료분비표체,발효액매활체도3 030 U/mL.중조기열당화매적최괄반응온도위90℃,최괄pH위6.0,해매구유교고적열은정성,재80℃시적반쇠기재60 min이상,구유량호적공업응용전경.
