生物医学工程与临床
生物醫學工程與臨床
생물의학공정여림상
BIOMEDICAL ENGINEERING AND CLINICAL MEDICINE
2012年
3期
283-286
,共4页
朱琳%刘兰霞%宋丽萍%冷希岗
硃琳%劉蘭霞%宋麗萍%冷希崗
주림%류란하%송려평%랭희강
LHRH-MPGΔNLS%纳米粒子%基因载体%小干扰RNA(siRNA)
LHRH-MPGΔNLS%納米粒子%基因載體%小榦擾RNA(siRNA)
LHRH-MPGΔNLS%납미입자%기인재체%소간우RNA(siRNA)
目的 设计并合成新型小干扰RNA(siRNA)载体促黄体激素释放激素-MPGΔNIS(LHRH-MPGΔNIS),考察不同N/P情况下LHRH- MPG△ΔNIS与siRNA结合情况并探索稳定的LHRH-MPGΔNIS/siRNA复合物的制备方法.方法 将LHRH-MPGΔNIS与针对甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的siRNA按N/P比为4∶1、6∶1、10∶1、12∶1的比例通过静电作用结合,制备多肽/siRNA复合物,并用琼脂糖凝胶电泳检测多肽与siRNA的结合情况.分别在pH值为7.0、75、8.0、8.5的溶液中制备N/P为20∶1的多肤/siRNA复合物,另在pH为7.0时按N/P为10∶1、15∶1、20:1制备多肽/siRNA复合物,BI-9000AT激光光散射仪分别检测其16d和20d内粒径大小变化情况,考察其稳定性.结果 LHRH-MPGΔNIS与siRNA在N/P大于10∶1时形成完全结合的复合物,即siRNA被多肽完全包裹.不同pH值溶液中形成的多肽/siRNA复合物稳定性没有明显的差别,且粒径均在100～280 nm,16d内未发生明显聚集.在pH为7.0时按N/P比为10∶1、15∶1、20∶1制备的LHRH-MPGΔNIS/siRNA复合物在20 d内粒径在150～450 nm分布,且未发生明显聚集,较为稳定.结论 实验研究设计了一种新型siRNA载体LHRH-MPGΔNIS,当N/P大于10∶1时其可将siRNA完全包裹；pH为7.0时N/P为10∶1、15∶1、20∶1时该载体与siRNA均可形成稳定的纳米级复合物,其中N/P为15∶1和20∶1的复合物粒径稳定性优于N/P为10∶1的复合物；在pH 7.0～8.5的溶液中形成的LHRH-MPGΔNIS/siRNA复合物均较稳定,没有明显差异.
目的 設計併閤成新型小榦擾RNA(siRNA)載體促黃體激素釋放激素-MPGΔNIS(LHRH-MPGΔNIS),攷察不同N/P情況下LHRH- MPG△ΔNIS與siRNA結閤情況併探索穩定的LHRH-MPGΔNIS/siRNA複閤物的製備方法.方法 將LHRH-MPGΔNIS與針對甘油醛-3-燐痠脫氫酶(GAPDH)基因的siRNA按N/P比為4∶1、6∶1、10∶1、12∶1的比例通過靜電作用結閤,製備多肽/siRNA複閤物,併用瓊脂糖凝膠電泳檢測多肽與siRNA的結閤情況.分彆在pH值為7.0、75、8.0、8.5的溶液中製備N/P為20∶1的多膚/siRNA複閤物,另在pH為7.0時按N/P為10∶1、15∶1、20:1製備多肽/siRNA複閤物,BI-9000AT激光光散射儀分彆檢測其16d和20d內粒徑大小變化情況,攷察其穩定性.結果 LHRH-MPGΔNIS與siRNA在N/P大于10∶1時形成完全結閤的複閤物,即siRNA被多肽完全包裹.不同pH值溶液中形成的多肽/siRNA複閤物穩定性沒有明顯的差彆,且粒徑均在100～280 nm,16d內未髮生明顯聚集.在pH為7.0時按N/P比為10∶1、15∶1、20∶1製備的LHRH-MPGΔNIS/siRNA複閤物在20 d內粒徑在150～450 nm分佈,且未髮生明顯聚集,較為穩定.結論 實驗研究設計瞭一種新型siRNA載體LHRH-MPGΔNIS,噹N/P大于10∶1時其可將siRNA完全包裹；pH為7.0時N/P為10∶1、15∶1、20∶1時該載體與siRNA均可形成穩定的納米級複閤物,其中N/P為15∶1和20∶1的複閤物粒徑穩定性優于N/P為10∶1的複閤物；在pH 7.0～8.5的溶液中形成的LHRH-MPGΔNIS/siRNA複閤物均較穩定,沒有明顯差異.
목적 설계병합성신형소간우RNA(siRNA)재체촉황체격소석방격소-MPGΔNIS(LHRH-MPGΔNIS),고찰불동N/P정황하LHRH- MPG△ΔNIS여siRNA결합정황병탐색은정적LHRH-MPGΔNIS/siRNA복합물적제비방법.방법 장LHRH-MPGΔNIS여침대감유철-3-린산탈경매(GAPDH)기인적siRNA안N/P비위4∶1、6∶1、10∶1、12∶1적비례통과정전작용결합,제비다태/siRNA복합물,병용경지당응효전영검측다태여siRNA적결합정황.분별재pH치위7.0、75、8.0、8.5적용액중제비N/P위20∶1적다부/siRNA복합물,령재pH위7.0시안N/P위10∶1、15∶1、20:1제비다태/siRNA복합물,BI-9000AT격광광산사의분별검측기16d화20d내립경대소변화정황,고찰기은정성.결과 LHRH-MPGΔNIS여siRNA재N/P대우10∶1시형성완전결합적복합물,즉siRNA피다태완전포과.불동pH치용액중형성적다태/siRNA복합물은정성몰유명현적차별,차립경균재100～280 nm,16d내미발생명현취집.재pH위7.0시안N/P비위10∶1、15∶1、20∶1제비적LHRH-MPGΔNIS/siRNA복합물재20 d내립경재150～450 nm분포,차미발생명현취집,교위은정.결론 실험연구설계료일충신형siRNA재체LHRH-MPGΔNIS,당N/P대우10∶1시기가장siRNA완전포과；pH위7.0시N/P위10∶1、15∶1、20∶1시해재체여siRNA균가형성은정적납미급복합물,기중N/P위15∶1화20∶1적복합물립경은정성우우N/P위10∶1적복합물；재pH 7.0～8.5적용액중형성적LHRH-MPGΔNIS/siRNA복합물균교은정,몰유명현차이.
