医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2012年
5期
110-114
,共5页
可替宁%NCI - H460肺癌细胞%凋亡%穿孔素%粒酶B
可替寧%NCI - H460肺癌細胞%凋亡%穿孔素%粒酶B
가체저%NCI - H460폐암세포%조망%천공소%립매B
目的 探讨可替宁对穿孔素/粒酶B( perforin/granzyme B)诱导的NCI - H460非小细胞肺癌细胞凋亡的抑制作用及其机制.方法 以人肺癌细胞株NCI - H460为研究对象.采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色检测细胞生长增殖活性,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染荧光显微镜下观察细胞凋亡形态学变化,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V -FITC/PI)染色后流式细胞仪定量检测细胞凋亡率,RT - PCR及Western blot法检测凋亡抑制蛋白XIAP及Survivin的表达量.结果 (1)不同浓度可替宁单独作用NCI - H460细胞时未见明显诱导凋亡现象,可显著抑制细胞生长,其抑制率与作用时间和剂量呈正相关.(2)0.25μg/ml浓度穿孔素作用NCI - H460细胞(1×106个)时,PI染核率可达到90％以上.而当加入1.5μl粒酶B(1 μg/ml)孵育6h时,穿孔素/粒酶B组细胞可呈现90％以上的凋亡现象.(3)166ng/ml浓度可替宁作用穿孔素/粒酶B预处理的细胞6h时可见明显凋亡抑制现象,当检测其凋亡抑制蛋白XIAP、survivin表达量时,发现穿孔素/粒酶B组表达量明显降低,可替宁组表达量较高,而当可替宁联合穿孔素/粒酶B时表达量最高.结论 可替宁可明显抑制穿孔素/粒酶B诱导的NCI- H460肺癌细胞凋亡现象,这种作用可能与凋亡抑制蛋白XIAP、survivin的表达上调有关.
目的 探討可替寧對穿孔素/粒酶B( perforin/granzyme B)誘導的NCI - H460非小細胞肺癌細胞凋亡的抑製作用及其機製.方法 以人肺癌細胞株NCI - H460為研究對象.採用四甲基偶氮噻唑藍(MTT)比色檢測細胞生長增殖活性,吖啶橙/溴化乙錠(AO/EB)雙染熒光顯微鏡下觀察細胞凋亡形態學變化,異硫氰痠熒光素標記的膜聯蛋白V/碘化丙啶(Annexin V -FITC/PI)染色後流式細胞儀定量檢測細胞凋亡率,RT - PCR及Western blot法檢測凋亡抑製蛋白XIAP及Survivin的錶達量.結果 (1)不同濃度可替寧單獨作用NCI - H460細胞時未見明顯誘導凋亡現象,可顯著抑製細胞生長,其抑製率與作用時間和劑量呈正相關.(2)0.25μg/ml濃度穿孔素作用NCI - H460細胞(1×106箇)時,PI染覈率可達到90％以上.而噹加入1.5μl粒酶B(1 μg/ml)孵育6h時,穿孔素/粒酶B組細胞可呈現90％以上的凋亡現象.(3)166ng/ml濃度可替寧作用穿孔素/粒酶B預處理的細胞6h時可見明顯凋亡抑製現象,噹檢測其凋亡抑製蛋白XIAP、survivin錶達量時,髮現穿孔素/粒酶B組錶達量明顯降低,可替寧組錶達量較高,而噹可替寧聯閤穿孔素/粒酶B時錶達量最高.結論 可替寧可明顯抑製穿孔素/粒酶B誘導的NCI- H460肺癌細胞凋亡現象,這種作用可能與凋亡抑製蛋白XIAP、survivin的錶達上調有關.
목적 탐토가체저대천공소/립매B( perforin/granzyme B)유도적NCI - H460비소세포폐암세포조망적억제작용급기궤제.방법 이인폐암세포주NCI - H460위연구대상.채용사갑기우담새서람(MTT)비색검측세포생장증식활성,아정등/추화을정(AO/EB)쌍염형광현미경하관찰세포조망형태학변화,이류청산형광소표기적막련단백V/전화병정(Annexin V -FITC/PI)염색후류식세포의정량검측세포조망솔,RT - PCR급Western blot법검측조망억제단백XIAP급Survivin적표체량.결과 (1)불동농도가체저단독작용NCI - H460세포시미견명현유도조망현상,가현저억제세포생장,기억제솔여작용시간화제량정정상관.(2)0.25μg/ml농도천공소작용NCI - H460세포(1×106개)시,PI염핵솔가체도90％이상.이당가입1.5μl립매B(1 μg/ml)부육6h시,천공소/립매B조세포가정현90％이상적조망현상.(3)166ng/ml농도가체저작용천공소/립매B예처리적세포6h시가견명현조망억제현상,당검측기조망억제단백XIAP、survivin표체량시,발현천공소/립매B조표체량명현강저,가체저조표체량교고,이당가체저연합천공소/립매B시표체량최고.결론 가체저가명현억제천공소/립매B유도적NCI- H460폐암세포조망현상,저충작용가능여조망억제단백XIAP、survivin적표체상조유관.
