吉林大学学报(医学版)
吉林大學學報(醫學版)
길림대학학보(의학판)
JOURNAL OF JILIN UNIVERSITY(MEDICINE EDITION)
2003年
3期
283-285
,共3页
卜丽莎%侯睿智%杜珍武%王维忠
蔔麗莎%侯睿智%杜珍武%王維忠
복려사%후예지%두진무%왕유충
p21WAF1/CIP1%HCT/8%质粒%脂质体%基因表达%肿瘤细胞,培养的%转染
p21WAF1/CIP1%HCT/8%質粒%脂質體%基因錶達%腫瘤細胞,培養的%轉染
p21WAF1/CIP1%HCT/8%질립%지질체%기인표체%종류세포,배양적%전염
目的:建立高效、稳定表达p21WAF1/CIP1大肠癌细胞株HCT/8-WAF1.方法:应用阳离子脂质体分别将带有目的基因WAF1的pcDNA3及空白pcDNA3质粒转染大肠癌细胞株HCT/8,经G418进行阳性筛选,将筛选的阳性细胞连续传代培养,应用免疫荧光技术监测p21WAF1/CIP1的表达.结果:经G418筛选后,空白对照细胞全部死亡,转染目的基因及空质粒组的细胞存活,可连续传代培养30代以上,并选择HCT/8作对照;免疫荧光技术监测p21WAF1/CIP1表达结果显示转染目的基因的HCT/8细胞p21WAF1/CIP1表达阳性细胞率(89.96%)显著高于转染空质粒组(8.02%)和空白对照组(3.39%)(F=16 608.99,P<0.001);各代间差异无显著性(F=2.171,P>0.05).结论:HCT/8-WAF1是一株高效、稳定表达p21WAF1/CIP1的大肠癌细胞株.
目的:建立高效、穩定錶達p21WAF1/CIP1大腸癌細胞株HCT/8-WAF1.方法:應用暘離子脂質體分彆將帶有目的基因WAF1的pcDNA3及空白pcDNA3質粒轉染大腸癌細胞株HCT/8,經G418進行暘性篩選,將篩選的暘性細胞連續傳代培養,應用免疫熒光技術鑑測p21WAF1/CIP1的錶達.結果:經G418篩選後,空白對照細胞全部死亡,轉染目的基因及空質粒組的細胞存活,可連續傳代培養30代以上,併選擇HCT/8作對照;免疫熒光技術鑑測p21WAF1/CIP1錶達結果顯示轉染目的基因的HCT/8細胞p21WAF1/CIP1錶達暘性細胞率(89.96%)顯著高于轉染空質粒組(8.02%)和空白對照組(3.39%)(F=16 608.99,P<0.001);各代間差異無顯著性(F=2.171,P>0.05).結論:HCT/8-WAF1是一株高效、穩定錶達p21WAF1/CIP1的大腸癌細胞株.
목적:건립고효、은정표체p21WAF1/CIP1대장암세포주HCT/8-WAF1.방법:응용양리자지질체분별장대유목적기인WAF1적pcDNA3급공백pcDNA3질립전염대장암세포주HCT/8,경G418진행양성사선,장사선적양성세포련속전대배양,응용면역형광기술감측p21WAF1/CIP1적표체.결과:경G418사선후,공백대조세포전부사망,전염목적기인급공질립조적세포존활,가련속전대배양30대이상,병선택HCT/8작대조;면역형광기술감측p21WAF1/CIP1표체결과현시전염목적기인적HCT/8세포p21WAF1/CIP1표체양성세포솔(89.96%)현저고우전염공질립조(8.02%)화공백대조조(3.39%)(F=16 608.99,P<0.001);각대간차이무현저성(F=2.171,P>0.05).결론:HCT/8-WAF1시일주고효、은정표체p21WAF1/CIP1적대장암세포주.