浙江大学学报(农业与生命科学版)
浙江大學學報(農業與生命科學版)
절강대학학보(농업여생명과학판)
2004年
6期
679-683
,共5页
吕文平%许梓荣%孙建义%李卫芬%杜文理
呂文平%許梓榮%孫建義%李衛芬%杜文理
려문평%허재영%손건의%리위분%두문리
β-葡聚糖酶%短小芽孢杆菌%克隆%表达
β-葡聚糖酶%短小芽孢桿菌%剋隆%錶達
β-포취당매%단소아포간균%극륭%표체
提取短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)基因组,通过PCR克隆了短小芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因全长序列.结果表明:该基因全长754 bp,ORF为717 bp,编码239个氨基酸,计算分子量为26.98 kD,等电点为6.08.经Blast分析,该序列与地衣芽孢杆菌同源性最高(91%),该基因首次在GenBank上登录(登录号AY164456).在克隆载体上亚克隆基因全长,构建重组表达载体pET-pum,导入大肠杆菌BL 21中表达.SDS-PAGE电泳表明:在27 kD左右有表达带,酶活较低(7.24 U/mL),仅为出发菌酶活的16%,其最适温度为50 ℃左右,最适pH在5左右.
提取短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)基因組,通過PCR剋隆瞭短小芽孢桿菌β-葡聚糖酶基因全長序列.結果錶明:該基因全長754 bp,ORF為717 bp,編碼239箇氨基痠,計算分子量為26.98 kD,等電點為6.08.經Blast分析,該序列與地衣芽孢桿菌同源性最高(91%),該基因首次在GenBank上登錄(登錄號AY164456).在剋隆載體上亞剋隆基因全長,構建重組錶達載體pET-pum,導入大腸桿菌BL 21中錶達.SDS-PAGE電泳錶明:在27 kD左右有錶達帶,酶活較低(7.24 U/mL),僅為齣髮菌酶活的16%,其最適溫度為50 ℃左右,最適pH在5左右.
제취단소아포간균(Bacillus pumilus)기인조,통과PCR극륭료단소아포간균β-포취당매기인전장서렬.결과표명:해기인전장754 bp,ORF위717 bp,편마239개안기산,계산분자량위26.98 kD,등전점위6.08.경Blast분석,해서렬여지의아포간균동원성최고(91%),해기인수차재GenBank상등록(등록호AY164456).재극륭재체상아극륭기인전장,구건중조표체재체pET-pum,도입대장간균BL 21중표체.SDS-PAGE전영표명:재27 kD좌우유표체대,매활교저(7.24 U/mL),부위출발균매활적16%,기최괄온도위50 ℃좌우,최괄pH재5좌우.
