纤溶酶原K5抗血管增生活性依赖其完整Kringle结构域
섬용매원K5항혈관증생활성의뢰기완정Kringle결구역
Anti-angiogenic Activity of Plasminogen Kringle 5 Depending on Its Intact Kringle Domain
  • 万方数据
    中国生物化学与分子生物学报 중국생물화학여분자생물학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
    2006年 1期 17-23 ,共7页

    李朝阳%蔡卫斌%杨中汉%杨霞%宋志宏%周世豪%李明友%刘祖国%高国全

    리조양%채위빈%양중한%양하%송지굉%주세호%리명우%류조국%고국전

    纤溶酶原%Kringle5%血管增生抑制因子%缺失突变体%结构与功能 纖溶酶原%Kringle5%血管增生抑製因子%缺失突變體%結構與功能
    섬용매원%Kringle5%혈관증생억제인자%결실돌변체%결구여공능
    根据K5蛋白(Pr0451-Ala41)的结构特征和二硫键分布特点,设计K5的两个缺失突变体K5mut1(Cys461-Cys540,保留K5 kringle环3个完整二硫键但去除N端和C端多余氨基酸)和K5mut2(Cys482-Cys535,打开Kringle环,只保留2个二硫键).以野生型人纤溶酶原K5 cDNA为模板,用PCR方法得到编码缺失突变体的DNA片段,定向克隆入pET22b(+)质粒载体,重组体转化进大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达,产物经亲和层析和高浓度甘油透析纯化后进行鉴定和生物活性测定.K5 mut1蛋白特异性抑制人视网膜微血管内皮细胞增殖,且活性强度是完整的K5蛋白2倍;K5mut2对人视网膜微血管内皮细胞无显著抑制作用.结果提示,完整的Kringle结构(包含3个二硫键)是维持人纤溶酶原K5抗血管增生活性的必需结构域,而K5分子中Kringle结构域外的N端和C端氨基酸臂则并非其活性所必需.
    근거K5단백(Pr0451-Ala41)적결구특정화이류건분포특점,설계K5적량개결실돌변체K5mut1(Cys461-Cys540,보류K5 kringle배3개완정이류건단거제N단화C단다여안기산)화K5mut2(Cys482-Cys535,타개Kringle배,지보류2개이류건).이야생형인섬용매원K5 cDNA위모판,용PCR방법득도편마결실돌변체적DNA편단,정향극륭입pET22b(+)질립재체,중조체전화진대장간균BL21(DE3),유도표체,산물경친화층석화고농도감유투석순화후진행감정화생물활성측정.K5 mut1단백특이성억제인시망막미혈관내피세포증식,차활성강도시완정적K5단백2배;K5mut2대인시망막미혈관내피세포무현저억제작용.결과제시,완정적Kringle결구(포함3개이류건)시유지인섬용매원K5항혈관증생활성적필수결구역,이K5분자중Kringle결구역외적N단화C단안기산비칙병비기활성소필수.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문