CAJ | 학술논문

将本实验室分离保存的NA-1株鹅副粘病毒(GPMV)经SPF鸡胚增殖,收集鸡胚尿囊液进行病毒纯化,提取病毒基因组RNA.参考GenBank已收录的GPMV ZJ1株基因组序列,设计了8对特异性引物,RT-PCR法分别特异性的扩增出病毒各基因片段,并将各目的基因片段回收纯化,克隆PGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,小提质粒选取阳性克隆酶切鉴定并进行序列测定,对测定结果进行拼接得到全长cDNA序列(GenBank登录号:DQ659677).NA-1株核苷酸比新城疫病毒(NDV)核苷酸多6个碱基,位于1 644～1 645 nt之间,符合NDV核苷酸"六碱基原则".序列分析结果表明,GPMV NA-1株与各地代表株核苷酸同源性81.2%～91.3%.同时根据各毒株F基因开放阅读框前389个核苷酸序列绘制出系统发育进化树,结果表明GPMN NA-1株与SF02和QY97病毒株同属于基因Ⅶ型,不同于基因ⅨX型NDV的国家标准株F48E9和基因Ⅱ型的LaSota传统弱毒株.
장본실험실분리보존적NA-1주아부점병독(GPMV)경SPF계배증식,수집계배뇨낭액진행병독순화,제취병독기인조RNA.삼고GenBank이수록적GPMV ZJ1주기인조서렬,설계료8대특이성인물,RT-PCR법분별특이성적확증출병독각기인편단,병장각목적기인편단회수순화,극륭PGEM-T재체,전화대장간균DH5α,소제질립선취양성극륭매절감정병진행서렬측정,대측정결과진행병접득도전장cDNA서렬(GenBank등록호:DQ659677).NA-1주핵감산비신성역병독(NDV)핵감산다6개감기,위우1 644～1 645 nt지간,부합NDV핵감산"륙감기원칙".서렬분석결과표명,GPMV NA-1주여각지대표주핵감산동원성81.2%～91.3%.동시근거각독주F기인개방열독광전389개핵감산서렬회제출계통발육진화수,결과표명GPMN NA-1주여SF02화QY97병독주동속우기인Ⅶ형,불동우기인ⅨX형NDV적국가표준주F48E9화기인Ⅱ형적LaSota전통약독주.