南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2007年
1期
20-23
,共4页
温坤%丘立文%王压娣%车小燕
溫坤%丘立文%王壓娣%車小燕
온곤%구립문%왕압제%차소연
禽流感病毒%血凝素抗原%杆状病毒%昆虫细胞
禽流感病毒%血凝素抗原%桿狀病毒%昆蟲細胞
금류감병독%혈응소항원%간상병독%곤충세포
目的 应用杆状病毒-昆虫细胞表达体系克隆及表达禽流感病毒H5Nl血凝素H5抗原,鉴定其抗原性和生物活性.方法 PCR扩增禽流感病毒H5全长基因序列,克隆、转化制备重组杆状病毒Bacmid质粒,通过转染昆虫细胞制备重组杆状病毒进行蛋白表达.采用细胞免疫荧光、Western blotting和血凝试验分别对表达的蛋白进行抗原性和生物活性分析.结果 在昆虫细胞中成功表达禽流感病毒重组his-H5蛋白,其相对分子质量约为64 000,与豚鼠红细胞能够发生凝集反应,免疫荧光与Western blotting结果提示该重组蛋白能够与禽流感病毒H5标准血清中的抗体特异性结合.结论 经杆状病毒-昆虫细胞表达系统获得的重组his-H5抗原具备天然的生物活性和抗原性,该方法为进一步研究禽流感病毒血凝素抗原生物学特性以及制备亚单位疫苗、相关抗体奠定了基础.
目的 應用桿狀病毒-昆蟲細胞錶達體繫剋隆及錶達禽流感病毒H5Nl血凝素H5抗原,鑒定其抗原性和生物活性.方法 PCR擴增禽流感病毒H5全長基因序列,剋隆、轉化製備重組桿狀病毒Bacmid質粒,通過轉染昆蟲細胞製備重組桿狀病毒進行蛋白錶達.採用細胞免疫熒光、Western blotting和血凝試驗分彆對錶達的蛋白進行抗原性和生物活性分析.結果 在昆蟲細胞中成功錶達禽流感病毒重組his-H5蛋白,其相對分子質量約為64 000,與豚鼠紅細胞能夠髮生凝集反應,免疫熒光與Western blotting結果提示該重組蛋白能夠與禽流感病毒H5標準血清中的抗體特異性結閤.結論 經桿狀病毒-昆蟲細胞錶達繫統穫得的重組his-H5抗原具備天然的生物活性和抗原性,該方法為進一步研究禽流感病毒血凝素抗原生物學特性以及製備亞單位疫苗、相關抗體奠定瞭基礎.
목적 응용간상병독-곤충세포표체체계극륭급표체금류감병독H5Nl혈응소H5항원,감정기항원성화생물활성.방법 PCR확증금류감병독H5전장기인서렬,극륭、전화제비중조간상병독Bacmid질립,통과전염곤충세포제비중조간상병독진행단백표체.채용세포면역형광、Western blotting화혈응시험분별대표체적단백진행항원성화생물활성분석.결과 재곤충세포중성공표체금류감병독중조his-H5단백,기상대분자질량약위64 000,여돈서홍세포능구발생응집반응,면역형광여Western blotting결과제시해중조단백능구여금류감병독H5표준혈청중적항체특이성결합.결론 경간상병독-곤충세포표체계통획득적중조his-H5항원구비천연적생물활성화항원성,해방법위진일보연구금류감병독혈응소항원생물학특성이급제비아단위역묘、상관항체전정료기출.
