高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2007年
12期
1278-1282
,共5页
杨少丽%郑兰红%阎松%王征%林秀坤
楊少麗%鄭蘭紅%閻鬆%王徵%林秀坤
양소려%정란홍%염송%왕정%림수곤
RNA干扰%斑马鱼%血管形成%VEGF基因
RNA榦擾%斑馬魚%血管形成%VEGF基因
RNA간우%반마어%혈관형성%VEGF기인
运用RNA干扰技术,针对斑马鱼血管内皮生长因子(VEGF)基因设计并合成了特异性小分子干扰RNA(siRNA),并从血管形成水平研究了siRNA对VEGF基因表达的影响.为了得到能在体内稳定表达的siRNA,进一步以pSilencer 4.1-CMV Vector为载体,合成了短发夹RNA (shRNA)表达模板并定向克隆到CMV启动子下游,构建了shRNA表达载体.定量碱性磷酸酶染色显示注射合成的siRNA后胚胎新血管生成(angiogenesis)为71.8%,NBT/BCIP血管染色显示表达载体可以引起斑马鱼胚胎肠下静脉、节间血管发育缺陷,原位杂交结果显示胚胎头部及前原肾管部位VEGF表达异常.
運用RNA榦擾技術,針對斑馬魚血管內皮生長因子(VEGF)基因設計併閤成瞭特異性小分子榦擾RNA(siRNA),併從血管形成水平研究瞭siRNA對VEGF基因錶達的影響.為瞭得到能在體內穩定錶達的siRNA,進一步以pSilencer 4.1-CMV Vector為載體,閤成瞭短髮夾RNA (shRNA)錶達模闆併定嚮剋隆到CMV啟動子下遊,構建瞭shRNA錶達載體.定量堿性燐痠酶染色顯示註射閤成的siRNA後胚胎新血管生成(angiogenesis)為71.8%,NBT/BCIP血管染色顯示錶達載體可以引起斑馬魚胚胎腸下靜脈、節間血管髮育缺陷,原位雜交結果顯示胚胎頭部及前原腎管部位VEGF錶達異常.
운용RNA간우기술,침대반마어혈관내피생장인자(VEGF)기인설계병합성료특이성소분자간우RNA(siRNA),병종혈관형성수평연구료siRNA대VEGF기인표체적영향.위료득도능재체내은정표체적siRNA,진일보이pSilencer 4.1-CMV Vector위재체,합성료단발협RNA (shRNA)표체모판병정향극륭도CMV계동자하유,구건료shRNA표체재체.정량감성린산매염색현시주사합성적siRNA후배태신혈관생성(angiogenesis)위71.8%,NBT/BCIP혈관염색현시표체재체가이인기반마어배태장하정맥、절간혈관발육결함,원위잡교결과현시배태두부급전원신관부위VEGF표체이상.
