同济大学学报（医学版）
同濟大學學報（醫學版）
동제대학학보（의학판）
JOURNAL OF TONGJI UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE)
2008年
4期
39-43
,共5页
王博%吕立夏%陈鸿萍%邵一鸣%钟平%朱文斯
王博%呂立夏%陳鴻萍%邵一鳴%鐘平%硃文斯
왕박%려립하%진홍평%소일명%종평%주문사
HIV-1%液态芯片%NASBA%荧光定量PCR
HIV-1%液態芯片%NASBA%熒光定量PCR
HIV-1%액태심편%NASBA%형광정량PCR
目的 建立高敏感的液态芯片检测血液HIV-1 RNA的方法.方法 抽提NASBA(nucleic acid sequence-based amplification)确定HIV-1 RNA载量的患者血浆RNA,对HIV-1引物进行生物素标记,行一步法RT-PCR扩增靶HIV-1 gag区片段.PCR产物与两个交联HIV-1特异探针的微球杂交,同时对于H1V-1病毒载量在100～790拷贝/ml样本进行荧光定量PCR检测.结果 对NASBA确定阳性的上海108例(载量170～3 300 000)、COBAS定量的北京86例阳性(栽量477～2 040 000)以及5例NIH的HIV标准品(＜100;273;1 610;11 300;33 800)的结果进行液态芯片多区段检测HIV-1 RNA,总阳性率为96.98%(193/199),液态芯片检测的敏感性与NASBA、COBAS方法相当(P＞0.05),对于HIV-1 RNA载量在180～790拷贝/ml的13个样本的荧光定量PCR未检测到信号,液态芯片检测结果为阳性.结论 多区段液态芯片法检测HIV-1 RNA灵敏度高、特异性强、重复性好,降低漏检率,而且具有操作简便、快速、低成本的特点,将液态芯片技术应用于血液筛查将有助于提高HIV-1阳性血液的检出率和输血的安全性.
目的 建立高敏感的液態芯片檢測血液HIV-1 RNA的方法.方法 抽提NASBA(nucleic acid sequence-based amplification)確定HIV-1 RNA載量的患者血漿RNA,對HIV-1引物進行生物素標記,行一步法RT-PCR擴增靶HIV-1 gag區片段.PCR產物與兩箇交聯HIV-1特異探針的微毬雜交,同時對于H1V-1病毒載量在100～790拷貝/ml樣本進行熒光定量PCR檢測.結果 對NASBA確定暘性的上海108例(載量170～3 300 000)、COBAS定量的北京86例暘性(栽量477～2 040 000)以及5例NIH的HIV標準品(＜100;273;1 610;11 300;33 800)的結果進行液態芯片多區段檢測HIV-1 RNA,總暘性率為96.98%(193/199),液態芯片檢測的敏感性與NASBA、COBAS方法相噹(P＞0.05),對于HIV-1 RNA載量在180～790拷貝/ml的13箇樣本的熒光定量PCR未檢測到信號,液態芯片檢測結果為暘性.結論 多區段液態芯片法檢測HIV-1 RNA靈敏度高、特異性彊、重複性好,降低漏檢率,而且具有操作簡便、快速、低成本的特點,將液態芯片技術應用于血液篩查將有助于提高HIV-1暘性血液的檢齣率和輸血的安全性.
목적 건립고민감적액태심편검측혈액HIV-1 RNA적방법.방법 추제NASBA(nucleic acid sequence-based amplification)학정HIV-1 RNA재량적환자혈장RNA,대HIV-1인물진행생물소표기,행일보법RT-PCR확증파HIV-1 gag구편단.PCR산물여량개교련HIV-1특이탐침적미구잡교,동시대우H1V-1병독재량재100～790고패/ml양본진행형광정량PCR검측.결과 대NASBA학정양성적상해108례(재량170～3 300 000)、COBAS정량적북경86례양성(재량477～2 040 000)이급5례NIH적HIV표준품(＜100;273;1 610;11 300;33 800)적결과진행액태심편다구단검측HIV-1 RNA,총양성솔위96.98%(193/199),액태심편검측적민감성여NASBA、COBAS방법상당(P＞0.05),대우HIV-1 RNA재량재180～790고패/ml적13개양본적형광정량PCR미검측도신호,액태심편검측결과위양성.결론 다구단액태심편법검측HIV-1 RNA령민도고、특이성강、중복성호,강저루검솔,이차구유조작간편、쾌속、저성본적특점,장액태심편기술응용우혈액사사장유조우제고HIV-1양성혈액적검출솔화수혈적안전성.
