厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2010年
3期
391-395
,共5页
陶毅明%马素娟%邬小兵%龙敏南%黄建忠%陈清西
陶毅明%馬素娟%鄔小兵%龍敏南%黃建忠%陳清西
도의명%마소연%오소병%룡민남%황건충%진청서
灰绿曲霉%纤维素酶%外切葡聚糖酶%内切葡聚糖酶%分离纯化%酶学性质
灰綠麯黴%纖維素酶%外切葡聚糖酶%內切葡聚糖酶%分離純化%酶學性質
회록곡매%섬유소매%외절포취당매%내절포취당매%분리순화%매학성질
灰绿曲霉(Aspergillus glaucus)发酵液通过硫酸铵盐析、Sephadex G-100分子筛、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱和Phenyl Sepharose Fast Flow疏水层析,分离纯化一种外切葡聚糖酶(CBH)和一种内切葡聚糖酶(EG).通过SDS-PAGE和凝胶柱层析法测定分子质量表明:CBH全酶分子质量为71 ku,由两个分子质量为35 ku的同型亚基组成;EG为单体蛋白,全酶分子质量为32 ku.酶学性质研究表明:CBH催化pNPC的最适pH为6.0,最适温度为55 ℃,酶活在pH 5.0～8.0 区间和温度低于55 ℃时稳定;EG催化CMC-Na的最适pH为4.0,最适温度为50 ℃,酶活在pH 3.5～7.5区间和温度低于65 ℃时稳定.Na+、K+、Ba2+、Mg2+以及NO-3和SO2-4对CBH和EG酶活均无影响;Ca2+和Mn2+对CBH有激活作用,Fe2+和Mn2+对EG有激活作用,而Zn2+、Cd2+和Cu2+对CBH和EG均有不同程度的抑制效应.酶动力学分析表明:CBH催化pNPC水解的米氏常数Km值为1.4 mmol/L(pH 6.0,55 ℃),EG催化CMC-Na水解的米氏常数Km值为5.0 mg/mL(pH 4.0,50 ℃).
灰綠麯黴(Aspergillus glaucus)髮酵液通過硫痠銨鹽析、Sephadex G-100分子篩、DEAE Sepharose Fast Flow離子交換柱和Phenyl Sepharose Fast Flow疏水層析,分離純化一種外切葡聚糖酶(CBH)和一種內切葡聚糖酶(EG).通過SDS-PAGE和凝膠柱層析法測定分子質量錶明:CBH全酶分子質量為71 ku,由兩箇分子質量為35 ku的同型亞基組成;EG為單體蛋白,全酶分子質量為32 ku.酶學性質研究錶明:CBH催化pNPC的最適pH為6.0,最適溫度為55 ℃,酶活在pH 5.0～8.0 區間和溫度低于55 ℃時穩定;EG催化CMC-Na的最適pH為4.0,最適溫度為50 ℃,酶活在pH 3.5～7.5區間和溫度低于65 ℃時穩定.Na+、K+、Ba2+、Mg2+以及NO-3和SO2-4對CBH和EG酶活均無影響;Ca2+和Mn2+對CBH有激活作用,Fe2+和Mn2+對EG有激活作用,而Zn2+、Cd2+和Cu2+對CBH和EG均有不同程度的抑製效應.酶動力學分析錶明:CBH催化pNPC水解的米氏常數Km值為1.4 mmol/L(pH 6.0,55 ℃),EG催化CMC-Na水解的米氏常數Km值為5.0 mg/mL(pH 4.0,50 ℃).
회록곡매(Aspergillus glaucus)발효액통과류산안염석、Sephadex G-100분자사、DEAE Sepharose Fast Flow리자교환주화Phenyl Sepharose Fast Flow소수층석,분리순화일충외절포취당매(CBH)화일충내절포취당매(EG).통과SDS-PAGE화응효주층석법측정분자질량표명:CBH전매분자질량위71 ku,유량개분자질량위35 ku적동형아기조성;EG위단체단백,전매분자질량위32 ku.매학성질연구표명:CBH최화pNPC적최괄pH위6.0,최괄온도위55 ℃,매활재pH 5.0～8.0 구간화온도저우55 ℃시은정;EG최화CMC-Na적최괄pH위4.0,최괄온도위50 ℃,매활재pH 3.5～7.5구간화온도저우65 ℃시은정.Na+、K+、Ba2+、Mg2+이급NO-3화SO2-4대CBH화EG매활균무영향;Ca2+화Mn2+대CBH유격활작용,Fe2+화Mn2+대EG유격활작용,이Zn2+、Cd2+화Cu2+대CBH화EG균유불동정도적억제효응.매동역학분석표명:CBH최화pNPC수해적미씨상수Km치위1.4 mmol/L(pH 6.0,55 ℃),EG최화CMC-Na수해적미씨상수Km치위5.0 mg/mL(pH 4.0,50 ℃).
