杭州师范大学学报（自然科学版）
杭州師範大學學報（自然科學版）
항주사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HANGZHOU NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2010年
5期
372-378
,共7页
李铖璐%杜鹏飞%裴晓林%吴慧丽%谢开林%王秋岩
李鋮璐%杜鵬飛%裴曉林%吳慧麗%謝開林%王鞦巖
리성로%두붕비%배효림%오혜려%사개림%왕추암
2-脱氧-D-核酸-5-磷酸醛缩酶%连续醛缩%嗜热酶%乙醛抗性
2-脫氧-D-覈痠-5-燐痠醛縮酶%連續醛縮%嗜熱酶%乙醛抗性
2-탈양-D-핵산-5-린산철축매%련속철축%기열매%을철항성
在催化他汀药物中间体合成中,对高浓度乙醛底物的耐受是醛缩酶的重要应用性质.通过克隆并在大肠杆菌中过表达了来源于嗜热微生物Geobacillus thermodenitrificans的耐热醛缩酶(DERAGth),该蛋白质序列长度为223 aa,对应的分子量为25.0 kD.初步酶学性质表征结果表明,该酶对天然底物2-脱氧核酸-5-磷酸的活力19.3 U/mg,最适pH为7.5,最适温度为60 ℃.在40-100 ℃保温10 min的结果表明,DERAGth具有较好的热稳定性,在60 ℃下10 min活力仍保持100%.对乙醛耐受的实验表明,该酶在300 mmol乙醛中25 ℃保温2 h,剩余活力高于40%.连续醛缩活力对比实验结果表明,该酶的连续醛缩活力远大于来源于常温微生物的大肠杆菌醛缩酶.
在催化他汀藥物中間體閤成中,對高濃度乙醛底物的耐受是醛縮酶的重要應用性質.通過剋隆併在大腸桿菌中過錶達瞭來源于嗜熱微生物Geobacillus thermodenitrificans的耐熱醛縮酶(DERAGth),該蛋白質序列長度為223 aa,對應的分子量為25.0 kD.初步酶學性質錶徵結果錶明,該酶對天然底物2-脫氧覈痠-5-燐痠的活力19.3 U/mg,最適pH為7.5,最適溫度為60 ℃.在40-100 ℃保溫10 min的結果錶明,DERAGth具有較好的熱穩定性,在60 ℃下10 min活力仍保持100%.對乙醛耐受的實驗錶明,該酶在300 mmol乙醛中25 ℃保溫2 h,剩餘活力高于40%.連續醛縮活力對比實驗結果錶明,該酶的連續醛縮活力遠大于來源于常溫微生物的大腸桿菌醛縮酶.
재최화타정약물중간체합성중,대고농도을철저물적내수시철축매적중요응용성질.통과극륭병재대장간균중과표체료래원우기열미생물Geobacillus thermodenitrificans적내열철축매(DERAGth),해단백질서렬장도위223 aa,대응적분자량위25.0 kD.초보매학성질표정결과표명,해매대천연저물2-탈양핵산-5-린산적활력19.3 U/mg,최괄pH위7.5,최괄온도위60 ℃.재40-100 ℃보온10 min적결과표명,DERAGth구유교호적열은정성,재60 ℃하10 min활력잉보지100%.대을철내수적실험표명,해매재300 mmol을철중25 ℃보온2 h,잉여활력고우40%.련속철축활력대비실험결과표명,해매적련속철축활력원대우래원우상온미생물적대장간균철축매.
