中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2010年
7期
646-650
,共5页
公倩%李常颖%畅继武%朱铁虹
公倩%李常穎%暢繼武%硃鐵虹
공천%리상영%창계무%주철홍
噬菌体抗体库%抗体Fab段%人源化抗体
噬菌體抗體庫%抗體Fab段%人源化抗體
서균체항체고%항체Fab단%인원화항체
目的:构建人天然Fab段噬菌体抗体库,为人源抗体的制备建立技术平台.方法:从正常健康人的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,构建噬菌体抗体库,酶切鉴定有无插入片段并测序分析,用IL-2和地高辛进行富集筛选.结果:最终构建的抗体库库容约为8.4×107,酶切鉴定显示有插入片段,抗体库重组率是70%,DNA测序分析证实抗体重链属IgG亚类,轻链为λ链.用IL-2和地高辛进行三轮筛选,抗体库均得到了不同程度的富集.结论:成功构建了一个天然的人源化噬菌体抗体库,可用于下一步胰淀素人源化抗体的筛选、纯化和表达.
目的:構建人天然Fab段噬菌體抗體庫,為人源抗體的製備建立技術平檯.方法:從正常健康人的外週血淋巴細胞中提取總RNA,用RT-PCR方法擴增人抗體輕鏈和重鏈Fd段基因,構建噬菌體抗體庫,酶切鑒定有無插入片段併測序分析,用IL-2和地高辛進行富集篩選.結果:最終構建的抗體庫庫容約為8.4×107,酶切鑒定顯示有插入片段,抗體庫重組率是70%,DNA測序分析證實抗體重鏈屬IgG亞類,輕鏈為λ鏈.用IL-2和地高辛進行三輪篩選,抗體庫均得到瞭不同程度的富集.結論:成功構建瞭一箇天然的人源化噬菌體抗體庫,可用于下一步胰澱素人源化抗體的篩選、純化和錶達.
목적:구건인천연Fab단서균체항체고,위인원항체적제비건립기술평태.방법:종정상건강인적외주혈림파세포중제취총RNA,용RT-PCR방법확증인항체경련화중련Fd단기인,구건서균체항체고,매절감정유무삽입편단병측서분석,용IL-2화지고신진행부집사선.결과:최종구건적항체고고용약위8.4×107,매절감정현시유삽입편단,항체고중조솔시70%,DNA측서분석증실항체중련속IgG아류,경련위λ련.용IL-2화지고신진행삼륜사선,항체고균득도료불동정도적부집.결론:성공구건료일개천연적인원화서균체항체고,가용우하일보이정소인원화항체적사선、순화화표체.
