中华临床医师杂志（电子版）
中華臨床醫師雜誌（電子版）
중화림상의사잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF CLINICIANS(ELECTRONIC VERSION)
2012年
15期
4243-4247
,共5页
王媛%周晓生%葛汝丽%康慧聪%陈金波
王媛%週曉生%葛汝麗%康慧聰%陳金波
왕원%주효생%갈여려%강혜총%진금파
腺苷%显微镜检查,共焦%钙信号
腺苷%顯微鏡檢查,共焦%鈣信號
선감%현미경검사,공초%개신호
目的 在细胞水平研究腺苷对原代培养的SD大鼠海马神经元内钙离子振荡的具体影响,并探讨其可能的作用机制,从而为腺苷的抗癫痫作用提供实验依据.方法 本实验以SD大鼠新生48 h内的乳鼠作为取材对象,以胰酶消化加巴氏管机械吹打的方法,经条件培养基纯化建立原代培养海马神经元的研究模型.选取7～9 d的细胞,应用激光扫描共聚焦显微镜结合Fluo-3/AM标记技术,利用细胞外灌流方式给予腺苷的方法,检测腺苷干预前后钙离子振荡的相关指标.结果 原代培养的SD大鼠乳鼠的海马神经元在7～9 d发育基本成熟后可以观察到神经元内自发同步的钙离子振荡.给予腺苷后,发现Ade能抑制成熟海马神经元自发同步钙离子振荡的频率和幅度:频率从加药前的(0.020±0.003)Hz减少到(0.005±0.001)Hz,幅度从加药前的1.87±0.17下降到1.10±0.07,且这种抑制作用对于腺苷的浓度水平有一定的要求性.用高钾作为去极化刺激模拟癫痫状电活动时,钙离子震荡的频率加快,幅度增大,而腺苷对高钾诱发钙离子振荡的频率和幅度表现出了显著抑制作用.结论 在体外培养海马神经元的研究中发现,腺苷对海马神经元内钙离子振荡具有显著的抑制作用,这可能是腺苷作为内源性物质发挥抗癫痫作用的机制之一.
目的 在細胞水平研究腺苷對原代培養的SD大鼠海馬神經元內鈣離子振盪的具體影響,併探討其可能的作用機製,從而為腺苷的抗癲癇作用提供實驗依據.方法 本實驗以SD大鼠新生48 h內的乳鼠作為取材對象,以胰酶消化加巴氏管機械吹打的方法,經條件培養基純化建立原代培養海馬神經元的研究模型.選取7～9 d的細胞,應用激光掃描共聚焦顯微鏡結閤Fluo-3/AM標記技術,利用細胞外灌流方式給予腺苷的方法,檢測腺苷榦預前後鈣離子振盪的相關指標.結果 原代培養的SD大鼠乳鼠的海馬神經元在7～9 d髮育基本成熟後可以觀察到神經元內自髮同步的鈣離子振盪.給予腺苷後,髮現Ade能抑製成熟海馬神經元自髮同步鈣離子振盪的頻率和幅度:頻率從加藥前的(0.020±0.003)Hz減少到(0.005±0.001)Hz,幅度從加藥前的1.87±0.17下降到1.10±0.07,且這種抑製作用對于腺苷的濃度水平有一定的要求性.用高鉀作為去極化刺激模擬癲癇狀電活動時,鈣離子震盪的頻率加快,幅度增大,而腺苷對高鉀誘髮鈣離子振盪的頻率和幅度錶現齣瞭顯著抑製作用.結論 在體外培養海馬神經元的研究中髮現,腺苷對海馬神經元內鈣離子振盪具有顯著的抑製作用,這可能是腺苷作為內源性物質髮揮抗癲癇作用的機製之一.
목적 재세포수평연구선감대원대배양적SD대서해마신경원내개리자진탕적구체영향,병탐토기가능적작용궤제,종이위선감적항전간작용제공실험의거.방법 본실험이SD대서신생48 h내적유서작위취재대상,이이매소화가파씨관궤계취타적방법,경조건배양기순화건립원대배양해마신경원적연구모형.선취7～9 d적세포,응용격광소묘공취초현미경결합Fluo-3/AM표기기술,이용세포외관류방식급여선감적방법,검측선감간예전후개리자진탕적상관지표.결과 원대배양적SD대서유서적해마신경원재7～9 d발육기본성숙후가이관찰도신경원내자발동보적개리자진탕.급여선감후,발현Ade능억제성숙해마신경원자발동보개리자진탕적빈솔화폭도:빈솔종가약전적(0.020±0.003)Hz감소도(0.005±0.001)Hz,폭도종가약전적1.87±0.17하강도1.10±0.07,차저충억제작용대우선감적농도수평유일정적요구성.용고갑작위거겁화자격모의전간상전활동시,개리자진탕적빈솔가쾌,폭도증대,이선감대고갑유발개리자진탕적빈솔화폭도표현출료현저억제작용.결론 재체외배양해마신경원적연구중발현,선감대해마신경원내개리자진탕구유현저적억제작용,저가능시선감작위내원성물질발휘항전간작용적궤제지일.
