CAJ | 학술논문

本实验主要研究脂质体量、质粒量、细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间、细胞传代次数以及细胞种类对转基因效率的影响.首先研究了脂质体量、质粒量和细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间对小鼠胎儿成纤维细胞(MFFC)的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响.结果表明,在本实验条件下,用传至3代的MFFC,24孔培养板中每孔接种4-10×104个细胞,70%-90%贴满程度,当脂质体(LipofectAMINE)4μg、质粒(pEGFP-N1)0.3μg,复合物作用时间为6h时获得的转染效率最高,为30.7%.用此方案比较不同传代次数的MFFC转染效率结果表明,原代细胞的转染效率为10.0%,3代为28.9%,到15代降到7.2%.说明随着传代次数的增加,转染效率逐渐降低.将MFFC、小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和小鼠颗粒细胞(MGC)分别传至3代,采用上述方案进行转染,转染效率分别是27.8%、13.7%和14.2%.可见不同种类细胞的转染效率不同.细胞周期检测表明,无论是不同代次的细胞还是不同种类的细胞,其转染效率高低与M期所占比例的多少有关.这为如何提高转染效率提供了有利的依据.
본실험주요연구지질체량、질립량、세포재지질체-질립복합물중폭로시간、세포전대차수이급세포충류대전기인효솔적영향.수선연구료지질체량、질립량화세포재지질체-질립복합물중폭로시간대소서태인성섬유세포(MFFC)적록색형광단백(GFP)전염효솔적영향.결과표명,재본실험조건하,용전지3대적MFFC,24공배양판중매공접충4-10×104개세포,70%-90%첩만정도,당지질체(LipofectAMINE)4μg、질립(pEGFP-N1)0.3μg,복합물작용시간위6h시획득적전염효솔최고,위30.7%.용차방안비교불동전대차수적MFFC전염효솔결과표명,원대세포적전염효솔위10.0%,3대위28.9%,도15대강도7.2%.설명수착전대차수적증가,전염효솔축점강저.장MFFC、소서수란관상피세포(MOEC)화소서과립세포(MGC)분별전지3대,채용상술방안진행전염,전염효솔분별시27.8%、13.7%화14.2%.가견불동충류세포적전염효솔불동.세포주기검측표명,무론시불동대차적세포환시불동충류적세포,기전염효솔고저여M기소점비례적다소유관.저위여하제고전염효솔제공료유리적의거.