中国感染与化疗杂志
中國感染與化療雜誌
중국감염여화료잡지
CHINESE JOURNAL OF INFECTION AND CHEMOTHERAPY
2006年
3期
154-158
,共5页
赵旭%朱德妹%张婴元%郑兆鑫%严维耀
趙旭%硃德妹%張嬰元%鄭兆鑫%嚴維耀
조욱%주덕매%장영원%정조흠%엄유요
表皮葡萄球菌%纤维蛋白原结合基因%同源重组
錶皮葡萄毬菌%纖維蛋白原結閤基因%同源重組
표피포도구균%섬유단백원결합기인%동원중조
目的 构建表皮葡萄球菌(表葡菌)纤维蛋白原结合基因(fbe基因)缺失突变菌株,为fbe基因功能研究提供实验工具.方法 采用同源基因重组技术.构建质粒ΔpBT2(含fbe::ermB基因),将其电转化进入金葡菌RN4220,再次抽提后电转化进入fbe基因阳性表葡菌(HB)中.将含有质粒ΔpBT2的表葡菌HB在5 mg/L红霉素平板 42℃经多次传代,使质粒ΔpBT2裂解,fbe::ermB基因同源重组到表葡菌HB的染色体上,通过红霉素耐药、氯霉素敏感等特性筛选出含有fbe::ermB基因的新表葡菌HB-ermB.结果 经酶切鉴定后确认质粒ΔpBT2构建成功以及成功转导入金葡菌RN4220和表葡菌HB中,经PCR方法以及测序确认表葡菌HB的fbe基因缺失突变菌株HB-ermB构建成功.结论 采用同源重组的方法完成了表葡菌HB的fbe基因缺失突变菌株的构建.
目的 構建錶皮葡萄毬菌(錶葡菌)纖維蛋白原結閤基因(fbe基因)缺失突變菌株,為fbe基因功能研究提供實驗工具.方法 採用同源基因重組技術.構建質粒ΔpBT2(含fbe::ermB基因),將其電轉化進入金葡菌RN4220,再次抽提後電轉化進入fbe基因暘性錶葡菌(HB)中.將含有質粒ΔpBT2的錶葡菌HB在5 mg/L紅黴素平闆 42℃經多次傳代,使質粒ΔpBT2裂解,fbe::ermB基因同源重組到錶葡菌HB的染色體上,通過紅黴素耐藥、氯黴素敏感等特性篩選齣含有fbe::ermB基因的新錶葡菌HB-ermB.結果 經酶切鑒定後確認質粒ΔpBT2構建成功以及成功轉導入金葡菌RN4220和錶葡菌HB中,經PCR方法以及測序確認錶葡菌HB的fbe基因缺失突變菌株HB-ermB構建成功.結論 採用同源重組的方法完成瞭錶葡菌HB的fbe基因缺失突變菌株的構建.
목적 구건표피포도구균(표포균)섬유단백원결합기인(fbe기인)결실돌변균주,위fbe기인공능연구제공실험공구.방법 채용동원기인중조기술.구건질립ΔpBT2(함fbe::ermB기인),장기전전화진입금포균RN4220,재차추제후전전화진입fbe기인양성표포균(HB)중.장함유질립ΔpBT2적표포균HB재5 mg/L홍매소평판 42℃경다차전대,사질립ΔpBT2렬해,fbe::ermB기인동원중조도표포균HB적염색체상,통과홍매소내약、록매소민감등특성사선출함유fbe::ermB기인적신표포균HB-ermB.결과 경매절감정후학인질립ΔpBT2구건성공이급성공전도입금포균RN4220화표포균HB중,경PCR방법이급측서학인표포균HB적fbe기인결실돌변균주HB-ermB구건성공.결론 채용동원중조적방법완성료표포균HB적fbe기인결실돌변균주적구건.
