产人胰岛素毕赤酵母工程菌的构建
산인이도소필적효모공정균적구건
Construction of a Transgenic Pichia Pastoris Strain Yielding Human Insulin
  • 万方数据
    南开大学学报（自然科学版） 남개대학학보（자연과학판）
    ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS(NATURAL SCIENCE EDITION)
    2006年 5期 69-73 ,共5页

    王隆飞%方园园%陈功%博涛%侯健华%杨少辉%李桂兰%李欣%李明刚

    왕륭비%방완완%진공%박도%후건화%양소휘%리계란%리흔%리명강

    人胰岛素基因%毕赤酵母%分泌性表达 人胰島素基因%畢赤酵母%分泌性錶達
    인이도소기인%필적효모%분비성표체
    根据人胰岛素的氨基酸序列和酵母偏爱的密码子,采用基因半合成技术合成人胰岛素基因.将合成的胰岛素基因克隆到pPIK9质粒,构建了毕赤(Pichia)酵母重组表达载体pPINS319,用BglⅡ线性化后用电转化法导入毕赤酵母GSll5菌株,经过营养筛选和PCR复筛,得到含人胰岛素基因的毕赤酵母工程菌株.经SDS-PAGR和密度扫描分析表明,合成的人胰岛素基因能够在毕赤酵母中高效分泌性表达,表达量可达0.563 mg/mL,表达产物无需转肽过程,只经过胰蛋白酶和羧肽酶B简单处理即得到优质重组人胰岛素,其体内活力约为30 IU/mg.
    근거인이도소적안기산서렬화효모편애적밀마자,채용기인반합성기술합성인이도소기인.장합성적이도소기인극륭도pPIK9질립,구건료필적(Pichia)효모중조표체재체pPINS319,용BglⅡ선성화후용전전화법도입필적효모GSll5균주,경과영양사선화PCR복사,득도함인이도소기인적필적효모공정균주.경SDS-PAGR화밀도소묘분석표명,합성적인이도소기인능구재필적효모중고효분비성표체,표체량가체0.563 mg/mL,표체산물무수전태과정,지경과이단백매화최태매B간단처리즉득도우질중조인이도소,기체내활력약위30 IU/mg.
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