四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2006年
6期
1369-1373
,共5页
卢锦%霍蕾%田天丽%徐非一%刘玉应%孙启玲
盧錦%霍蕾%田天麗%徐非一%劉玉應%孫啟玲
로금%곽뢰%전천려%서비일%류옥응%손계령
重组葡激酶%工艺优化%高效表达
重組葡激酶%工藝優化%高效錶達
중조포격매%공예우화%고효표체
通过发酵和纯化条件的研究,建立适合重组葡激酶工程菌的发酵和纯化工艺.对重组葡激酶工程菌发酵过程中的pH、饱和氧浓度、补料以及诱导时间进行考察,获得该工程菌的高效表达条件.在此条件下,重组葡激酶表达水平在50%以上,并以活性可溶性状态存在于细胞内;经渗滤,超滤浓缩、透析,DEAE-Sepharose FF层析和Sp-Sepharose FF层析后,经SDS-PAGE和HPLC分析,纯度达到99%.在还原条件下进行SDS-PAGE分析,测得该酶相对分子质量为15.5kD,等电聚焦显示其等电点为8.4.
通過髮酵和純化條件的研究,建立適閤重組葡激酶工程菌的髮酵和純化工藝.對重組葡激酶工程菌髮酵過程中的pH、飽和氧濃度、補料以及誘導時間進行攷察,穫得該工程菌的高效錶達條件.在此條件下,重組葡激酶錶達水平在50%以上,併以活性可溶性狀態存在于細胞內;經滲濾,超濾濃縮、透析,DEAE-Sepharose FF層析和Sp-Sepharose FF層析後,經SDS-PAGE和HPLC分析,純度達到99%.在還原條件下進行SDS-PAGE分析,測得該酶相對分子質量為15.5kD,等電聚焦顯示其等電點為8.4.
통과발효화순화조건적연구,건립괄합중조포격매공정균적발효화순화공예.대중조포격매공정균발효과정중적pH、포화양농도、보료이급유도시간진행고찰,획득해공정균적고효표체조건.재차조건하,중조포격매표체수평재50%이상,병이활성가용성상태존재우세포내;경삼려,초려농축、투석,DEAE-Sepharose FF층석화Sp-Sepharose FF층석후,경SDS-PAGE화HPLC분석,순도체도99%.재환원조건하진행SDS-PAGE분석,측득해매상대분자질량위15.5kD,등전취초현시기등전점위8.4.
