复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2009年
3期
323-327
,共5页
范钰%钟锡明%陈坚%林庚金
範鈺%鐘錫明%陳堅%林庚金
범옥%종석명%진견%림경금
大肠肿瘤%促肝细胞再生磷酸酶-3%侵袭%失巢凋亡
大腸腫瘤%促肝細胞再生燐痠酶-3%侵襲%失巢凋亡
대장종류%촉간세포재생린산매-3%침습%실소조망
目的 探讨促肝细胞再生磷酸酶(phosphatase of regenerating liver cell-3,PRL-3)基因对大肠癌细胞侵袭的影响及可能机制.方法 应用PRL-3基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理人大肠癌HCT116细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测PRL-3 mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力,采用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL检测癌细胞失巢凋亡情况.结果 转染组癌细胞PRL-3 mRNA和蛋白水平明显被抑制,且与时间和浓度相关.与对照组比较,转染组细胞所形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少,且呈时间和浓度依赖性.琼脂糖凝胶电泳和TUNEL结果显示,转染组细胞出现明显的凋亡现象:凋亡指数增加,出现明显的DNA条带.结论 PRL-3基因siRNA转染可明显抑制大肠癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭,其机制可能与诱导失巢凋亡有关.
目的 探討促肝細胞再生燐痠酶(phosphatase of regenerating liver cell-3,PRL-3)基因對大腸癌細胞侵襲的影響及可能機製.方法 應用PRL-3基因小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)轉染處理人大腸癌HCT116細胞後,分彆採用熒光實時定量RT-PCR和Western blot檢測PRL-3 mRNA和蛋白水平,分彆採用軟瓊脂集落培養試驗和Boyden小室模型試驗檢測癌細胞的錨著不依賴性增殖和侵襲能力,採用瓊脂糖凝膠電泳和TUNEL檢測癌細胞失巢凋亡情況.結果 轉染組癌細胞PRL-3 mRNA和蛋白水平明顯被抑製,且與時間和濃度相關.與對照組比較,轉染組細胞所形成的軟瓊脂集落數和穿膜細胞數明顯減少,且呈時間和濃度依賴性.瓊脂糖凝膠電泳和TUNEL結果顯示,轉染組細胞齣現明顯的凋亡現象:凋亡指數增加,齣現明顯的DNA條帶.結論 PRL-3基因siRNA轉染可明顯抑製大腸癌細胞的錨著不依賴性增殖和噁性侵襲,其機製可能與誘導失巢凋亡有關.
목적 탐토촉간세포재생린산매(phosphatase of regenerating liver cell-3,PRL-3)기인대대장암세포침습적영향급가능궤제.방법 응용PRL-3기인소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)전염처리인대장암HCT116세포후,분별채용형광실시정량RT-PCR화Western blot검측PRL-3 mRNA화단백수평,분별채용연경지집락배양시험화Boyden소실모형시험검측암세포적묘착불의뢰성증식화침습능력,채용경지당응효전영화TUNEL검측암세포실소조망정황.결과 전염조암세포PRL-3 mRNA화단백수평명현피억제,차여시간화농도상관.여대조조비교,전염조세포소형성적연경지집락수화천막세포수명현감소,차정시간화농도의뢰성.경지당응효전영화TUNEL결과현시,전염조세포출현명현적조망현상:조망지수증가,출현명현적DNA조대.결론 PRL-3기인siRNA전염가명현억제대장암세포적묘착불의뢰성증식화악성침습,기궤제가능여유도실소조망유관.
