水产科学
水產科學
수산과학
FISHERIES SCIENCE
2011年
2期
63-68
,共6页
董培培%李长红%丁文超%陈炯%史雨红%黎昊雁%李明云
董培培%李長紅%丁文超%陳炯%史雨紅%黎昊雁%李明雲
동배배%리장홍%정문초%진형%사우홍%려호안%리명운
鳗利斯顿氏菌%empA基因%环介导等温扩增技术%横向流动试纸条技术%检测
鰻利斯頓氏菌%empA基因%環介導等溫擴增技術%橫嚮流動試紙條技術%檢測
만리사돈씨균%empA기인%배개도등온확증기술%횡향류동시지조기술%검측
采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD),建立一种鳗利斯顿氏菌快速检测方法.针对鳗利斯顿氏菌金属蛋白酶基因设计一套特异性引物及异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的探针,结合生物素标记的环介导等温扩增技术扩增反应和横向流动试纸条技术对鳗利斯顿氏菌进行检测;比较LAMP-AGE,LAMP-LFD和PCR-AGE的灵敏度;选取4株鳗利斯顿氏菌和6株非鳗利斯顿氏菌验证LAMP-LFD特异性.试验结果表明,应用LAMP-LFD,能在30 min内完成鳗利斯顿氏菌的检测;LAMP-LFD检测的灵敏度为7.7cfu/ml,LAMP-AGE和PCR-AGE检测的灵敏度均为77cfu/ml; 4株鳗利斯顿氏菌均呈阳性反应,其他6株非鳗利斯顿氏菌均为阴性.应用LAMP-LFD检测鳗利斯顿氏菌特异性强、灵敏度高、并且操作安全、简便、快捷.
採用環介導等溫擴增技術(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),橫嚮流動試紙條技術(Lateral flow dipstick,LFD),建立一種鰻利斯頓氏菌快速檢測方法.針對鰻利斯頓氏菌金屬蛋白酶基因設計一套特異性引物及異硫氰痠熒光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)標記的探針,結閤生物素標記的環介導等溫擴增技術擴增反應和橫嚮流動試紙條技術對鰻利斯頓氏菌進行檢測;比較LAMP-AGE,LAMP-LFD和PCR-AGE的靈敏度;選取4株鰻利斯頓氏菌和6株非鰻利斯頓氏菌驗證LAMP-LFD特異性.試驗結果錶明,應用LAMP-LFD,能在30 min內完成鰻利斯頓氏菌的檢測;LAMP-LFD檢測的靈敏度為7.7cfu/ml,LAMP-AGE和PCR-AGE檢測的靈敏度均為77cfu/ml; 4株鰻利斯頓氏菌均呈暘性反應,其他6株非鰻利斯頓氏菌均為陰性.應用LAMP-LFD檢測鰻利斯頓氏菌特異性彊、靈敏度高、併且操作安全、簡便、快捷.
채용배개도등온확증기술(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),횡향류동시지조기술(Lateral flow dipstick,LFD),건립일충만리사돈씨균쾌속검측방법.침대만리사돈씨균금속단백매기인설계일투특이성인물급이류청산형광소(Fluorescein isothiocyanate,FITC)표기적탐침,결합생물소표기적배개도등온확증기술확증반응화횡향류동시지조기술대만리사돈씨균진행검측;비교LAMP-AGE,LAMP-LFD화PCR-AGE적령민도;선취4주만리사돈씨균화6주비만리사돈씨균험증LAMP-LFD특이성.시험결과표명,응용LAMP-LFD,능재30 min내완성만리사돈씨균적검측;LAMP-LFD검측적령민도위7.7cfu/ml,LAMP-AGE화PCR-AGE검측적령민도균위77cfu/ml; 4주만리사돈씨균균정양성반응,기타6주비만리사돈씨균균위음성.응용LAMP-LFD검측만리사돈씨균특이성강、령민도고、병차조작안전、간편、쾌첩.
