J亚群禽白血病病毒gp85基因在毕赤酵母中的分泌表达
J아군금백혈병병독gp85기인재필적효모중적분비표체
Secretory Expression of Avian Leukosis Virus Subgroup J gp85 Gene in Pichia pastoris
  • 万方数据
    中国畜牧兽医 중국축목수의
    CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
    2012年 4期 42-46 ,共5页

    徐延伟%高宏雷%高玉龙%李凯%高立%秦立廷%祁小乐%王永强%王笑梅

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    为获得J亚群禽白血病病毒gp85蛋白,将gp85基因克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K,构建了pPIC9K-gp85表达载体.将鉴定正确的表达载体经Sal Ⅰ酶切线性化后电转化毕赤酵母宿主菌GS115,经MD及G418抗性平板筛选后挑取阳性克隆进行PCR鉴定,获得重组酵母菌株GS115/pPIC9K-gp85.对阳性重组菌进行诱导表达,表达产物经SDS-PAGE、Western blotting和Dot-ELISA分析,结果表明,gp85基因在毕赤酵母中获得分泌表达,表达产物与J亚群禽白血病病毒多克隆抗体有良好的反应活性,分泌表达量达40mg/L.本研究为J亚群禽白血病病毒诊断方法的建立及gp85蛋白的深入研究奠定了基础.
    위획득J아군금백혈병병독gp85단백,장gp85기인극륭지필적효모표체재체pPIC9K,구건료pPIC9K-gp85표체재체.장감정정학적표체재체경Sal Ⅰ매절선성화후전전화필적효모숙주균GS115,경MD급G418항성평판사선후도취양성극륭진행PCR감정,획득중조효모균주GS115/pPIC9K-gp85.대양성중조균진행유도표체,표체산물경SDS-PAGE、Western blotting화Dot-ELISA분석,결과표명,gp85기인재필적효모중획득분비표체,표체산물여J아군금백혈병병독다극륭항체유량호적반응활성,분비표체량체40mg/L.본연구위J아군금백혈병병독진단방법적건립급gp85단백적심입연구전정료기출.
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