聚酰胺-胺型树枝状聚合物介导人凝血因子Ⅷ的体外高效稳定表达
취선알-알형수지상취합물개도인응혈인자Ⅷ적체외고효은정표체
Effective and stable in vitro expression of human coagulation factor Ⅷ by retrovirus-based plasmid vector coupled with polyamidoamine dendrimer
  • 万方数据
    中华血液学杂志 중화혈액학잡지
    Chinese Journal of Hematology
    2003年 9期 464-466 ,共3页

    康文英%王鸿利%王学锋%王红%王从珠%傅启华%丁秋兰%武文漫%方怡%段宝华

    강문영%왕홍리%왕학봉%왕홍%왕종주%부계화%정추란%무문만%방이%단보화

    纳米材料,聚酰胺-胺型树枝状聚合物%血液凝固因子Ⅷ%基因表达 納米材料,聚酰胺-胺型樹枝狀聚閤物%血液凝固因子Ⅷ%基因錶達
    납미재료,취선알-알형수지상취합물%혈액응고인자Ⅷ%기인표체
    目的应用纳米材料聚酰胺-胺型(PAMAM)树枝状聚合物/逆病毒基础的质粒载体复合体,在表达水平、持续时间和细胞毒性三方面进行血友病A基因治疗的体外研究.方法 PAMAM树枝状聚合物与含B区缺失(760 aa～1 639 aa)人FⅧ cDNA(FⅧBD cDNA)的以逆病毒为框架的重组表达质粒载体pLNC-FⅧBD形成复合体后,转染NIH3T3细胞系,于转染后第2,5,10,15,30 d留取细胞培养上清,分别采用一期法和ELISA法检测其中人FⅧ的凝血活性(FⅧ∶C)和抗原含量(FⅧ∶Ag),并应用RT-PCR方法检测细胞中FⅧBD cDNA的转录,以细胞生长抑制率来表示PAMAM的细胞毒性.结果 PAMAM载体介导的人FⅧ的体外表达可持续30 d,24 h内每ml细胞上清中106细胞表达FⅧ∶C平均为0.929 U,FⅧ∶Ag平均为0.188 μg,期间FⅧ表达未见降低;PAMAM的细胞生长抑制率为5.32%.结论 PAMAM能够有效介导逆病毒基础的质粒载体pLNC-FⅧBD转染靶细胞,并维持高效稳定表达,且PAMAM的细胞毒性较低.
    목적응용납미재료취선알-알형(PAMAM)수지상취합물/역병독기출적질립재체복합체,재표체수평、지속시간화세포독성삼방면진행혈우병A기인치료적체외연구.방법 PAMAM수지상취합물여함B구결실(760 aa～1 639 aa)인FⅧ cDNA(FⅧBD cDNA)적이역병독위광가적중조표체질립재체pLNC-FⅧBD형성복합체후,전염NIH3T3세포계,우전염후제2,5,10,15,30 d류취세포배양상청,분별채용일기법화ELISA법검측기중인FⅧ적응혈활성(FⅧ∶C)화항원함량(FⅧ∶Ag),병응용RT-PCR방법검측세포중FⅧBD cDNA적전록,이세포생장억제솔래표시PAMAM적세포독성.결과 PAMAM재체개도적인FⅧ적체외표체가지속30 d,24 h내매ml세포상청중106세포표체FⅧ∶C평균위0.929 U,FⅧ∶Ag평균위0.188 μg,기간FⅧ표체미견강저;PAMAM적세포생장억제솔위5.32%.결론 PAMAM능구유효개도역병독기출적질립재체pLNC-FⅧBD전염파세포,병유지고효은정표체,차PAMAM적세포독성교저.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문