生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2005年
3期
235-238
,共4页
原野%要晖宇%李秀森%郭子宽%吴英%江小霞%毛宁
原野%要暉宇%李秀森%郭子寬%吳英%江小霞%毛寧
원야%요휘우%리수삼%곽자관%오영%강소하%모저
人干细胞生长因子%Ca2+依赖糖识别结构域%融合表达
人榦細胞生長因子%Ca2+依賴糖識彆結構域%融閤錶達
인간세포생장인자%Ca2+의뢰당식별결구역%융합표체
本文作者已有的研究结果证明,完整的人干细胞生长因子(hSCGF)没有种属特异性,即可以作用于小鼠骨髓造血细胞.这一点与在Ca2+依赖糖识别结构域(CRD)缺失了78个氨基酸残基的截短分子(hSCGFβ)有所不同.本研究从hSCGF全长cDNA中完全删除了CRD结构域编码序列,进一步探讨CRD结构域的生物学功能.由于该突变体序列GC含量较高,因此将该缺失突变体序列克隆在GST融合表达载体中进行融合表达.通过低温(28℃)诱导,表达产物主要以可溶蛋白的形式存在.利用亲和层析纯化CRD结构域完全缺失的hSCGF突变体融合蛋白,通过检测重组突变分子的协同刺激造血活性有无改变来初步探讨CRD结构域在hSCGF分子中的生物学功能.研究结果表明,去掉完整CRD结构域的突变分子仍然具有造血刺激活性.据此推断CRD结构域在hSCGF分子中可能对于受体配体结合起辅助作用.
本文作者已有的研究結果證明,完整的人榦細胞生長因子(hSCGF)沒有種屬特異性,即可以作用于小鼠骨髓造血細胞.這一點與在Ca2+依賴糖識彆結構域(CRD)缺失瞭78箇氨基痠殘基的截短分子(hSCGFβ)有所不同.本研究從hSCGF全長cDNA中完全刪除瞭CRD結構域編碼序列,進一步探討CRD結構域的生物學功能.由于該突變體序列GC含量較高,因此將該缺失突變體序列剋隆在GST融閤錶達載體中進行融閤錶達.通過低溫(28℃)誘導,錶達產物主要以可溶蛋白的形式存在.利用親和層析純化CRD結構域完全缺失的hSCGF突變體融閤蛋白,通過檢測重組突變分子的協同刺激造血活性有無改變來初步探討CRD結構域在hSCGF分子中的生物學功能.研究結果錶明,去掉完整CRD結構域的突變分子仍然具有造血刺激活性.據此推斷CRD結構域在hSCGF分子中可能對于受體配體結閤起輔助作用.
본문작자이유적연구결과증명,완정적인간세포생장인자(hSCGF)몰유충속특이성,즉가이작용우소서골수조혈세포.저일점여재Ca2+의뢰당식별결구역(CRD)결실료78개안기산잔기적절단분자(hSCGFβ)유소불동.본연구종hSCGF전장cDNA중완전산제료CRD결구역편마서렬,진일보탐토CRD결구역적생물학공능.유우해돌변체서렬GC함량교고,인차장해결실돌변체서렬극륭재GST융합표체재체중진행융합표체.통과저온(28℃)유도,표체산물주요이가용단백적형식존재.이용친화층석순화CRD결구역완전결실적hSCGF돌변체융합단백,통과검측중조돌변분자적협동자격조혈활성유무개변래초보탐토CRD결구역재hSCGF분자중적생물학공능.연구결과표명,거도완정CRD결구역적돌변분자잉연구유조혈자격활성.거차추단CRD결구역재hSCGF분자중가능대우수체배체결합기보조작용.
