细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2006年
1期
82-83,85
,共3页
邵彬%聂青和%王平忠%李光玉%张亚飞%苟艳子
邵彬%聶青和%王平忠%李光玉%張亞飛%茍豔子
소빈%섭청화%왕평충%리광옥%장아비%구염자
金属蛋白酶组织抑制剂-1%夹心ELISA%肝纤维化
金屬蛋白酶組織抑製劑-1%夾心ELISA%肝纖維化
금속단백매조직억제제-1%협심ELISA%간섬유화
目的:建立一种快速检测肝病患者血清基质金属蛋白酶组织抑制剂-1( TIMP-1)的双抗体夹心ELISA,了解血清TIMP-1的水平与肝纤维化病程进展程度的关系.方法:以不同浓度的抗人TIMP-1单克隆抗体(mAb)为包被抗体,加入待测抗原以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TIMP-1 mAb作为标记抗体进行方阵滴定,建立双抗体夹心ELISA,并用于临床检测408例肝病患者血清TIMP-1的水平.结果:方阵滴定的结果表明包被抗体浓度为1 mg/L,血清稀释倍数1:100,HRP标记mAb的最佳工作浓度为1:400.以此条件建立的夹心ELISA法具有良好的可重复性,中和抑制率在85%以上,稳定性良好,与国外检测TIMP-1的ELISA试剂盒进行对比试验,具有良好的相关性(r=0.988).用于临床快速检测肝硬化的检出阳性率为76.4%,明显高于慢性肝炎(40.2%)和急性肝炎(19.5%,P<0.005),并随着患者肝纤维化程度的加重而升高(P<0.001).结论:血清TIMP-1水平的变化可作为诊断肝纤维化良好指标.本法简便、快速,敏感性高、特异性强,用于肝纤维化的人血清学快速诊断.尤其适于医院及基层医疗单位应用.
目的:建立一種快速檢測肝病患者血清基質金屬蛋白酶組織抑製劑-1( TIMP-1)的雙抗體夾心ELISA,瞭解血清TIMP-1的水平與肝纖維化病程進展程度的關繫.方法:以不同濃度的抗人TIMP-1單剋隆抗體(mAb)為包被抗體,加入待測抗原以及辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗TIMP-1 mAb作為標記抗體進行方陣滴定,建立雙抗體夾心ELISA,併用于臨床檢測408例肝病患者血清TIMP-1的水平.結果:方陣滴定的結果錶明包被抗體濃度為1 mg/L,血清稀釋倍數1:100,HRP標記mAb的最佳工作濃度為1:400.以此條件建立的夾心ELISA法具有良好的可重複性,中和抑製率在85%以上,穩定性良好,與國外檢測TIMP-1的ELISA試劑盒進行對比試驗,具有良好的相關性(r=0.988).用于臨床快速檢測肝硬化的檢齣暘性率為76.4%,明顯高于慢性肝炎(40.2%)和急性肝炎(19.5%,P<0.005),併隨著患者肝纖維化程度的加重而升高(P<0.001).結論:血清TIMP-1水平的變化可作為診斷肝纖維化良好指標.本法簡便、快速,敏感性高、特異性彊,用于肝纖維化的人血清學快速診斷.尤其適于醫院及基層醫療單位應用.
목적:건립일충쾌속검측간병환자혈청기질금속단백매조직억제제-1( TIMP-1)적쌍항체협심ELISA,료해혈청TIMP-1적수평여간섬유화병정진전정도적관계.방법:이불동농도적항인TIMP-1단극륭항체(mAb)위포피항체,가입대측항원이급랄근과양화물매(HRP)표기적항TIMP-1 mAb작위표기항체진행방진적정,건립쌍항체협심ELISA,병용우림상검측408례간병환자혈청TIMP-1적수평.결과:방진적정적결과표명포피항체농도위1 mg/L,혈청희석배수1:100,HRP표기mAb적최가공작농도위1:400.이차조건건립적협심ELISA법구유량호적가중복성,중화억제솔재85%이상,은정성량호,여국외검측TIMP-1적ELISA시제합진행대비시험,구유량호적상관성(r=0.988).용우림상쾌속검측간경화적검출양성솔위76.4%,명현고우만성간염(40.2%)화급성간염(19.5%,P<0.005),병수착환자간섬유화정도적가중이승고(P<0.001).결론:혈청TIMP-1수평적변화가작위진단간섬유화량호지표.본법간편、쾌속,민감성고、특이성강,용우간섬유화적인혈청학쾌속진단.우기괄우의원급기층의료단위응용.