CAJ | 학술논문

目的构建布氏杆菌BCSP31/pVAX1重组表达质粒,免疫BALB/c小鼠,观察其免疫应答及免疫保护效果. 方法克隆BCSP31基因,构建BCSP31/pVAX1重组表达质粒.转染COS-7细胞,免疫组化检测其BCSP31蛋白抗原的表达.BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉注射免疫BALB/c小鼠,观察特异性体液免疫和细胞免疫效果.进一步用1.25×104布氏杆菌A544强毒株腹腔攻毒,观察BCSP31/pVAX1重组表达质粒的免疫保护效果.结果扩增的BCSP31保护性抗原基因片断在牛、羊和猪布氏杆菌株中具有高度保守性,构建的BCSP31/pVAX1重组表达质粒在COS-7细胞有目的蛋白抗原的表达.制备的BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉免疫BALB/c小鼠4次,ELISA检测BCSP31/pVAX1重组表达质粒产生了较高水平的特异性IgG抗体,并随免疫次数增加抗体的滴度也递增,且抗体亚型以IgG2a为主,表明主要引起Th1型的免疫应答.FCM检测BCSP31/pVAX1重组表达质粒的CD4+/CD8+比值明显下降,说明激发了显著的CTL效应.MTT测定BCSP31/pVAX1重组表达质粒的淋巴细胞增殖能力与对照组比较差异显著.布氏杆菌A544强毒株攻毒后,动物存活及脾组织细菌数与对照组比较有显著性差异,说明BCSP31/pVAX1重组表达质粒能够产生有效的保护效果.结论研制的BCSP31/pVAX1重组表达质粒免疫BALB/c小鼠能产生高水平的特异性体液免疫和细胞免疫,以细胞免疫为主,并产生有效的免疫保护效果,为布氏杆菌病新型疫苗的研究奠定了基础.
목적구건포씨간균BCSP31/pVAX1중조표체질립,면역BALB/c소서,관찰기면역응답급면역보호효과. 방법극륭BCSP31기인,구건BCSP31/pVAX1중조표체질립.전염COS-7세포,면역조화검측기BCSP31단백항원적표체.BCSP31/pVAX1중조표체질립기육주사면역BALB/c소서,관찰특이성체액면역화세포면역효과.진일보용1.25×104포씨간균A544강독주복강공독,관찰BCSP31/pVAX1중조표체질립적면역보호효과.결과확증적BCSP31보호성항원기인편단재우、양화저포씨간균주중구유고도보수성,구건적BCSP31/pVAX1중조표체질립재COS-7세포유목적단백항원적표체.제비적BCSP31/pVAX1중조표체질립기육면역BALB/c소서4차,ELISA검측BCSP31/pVAX1중조표체질립산생료교고수평적특이성IgG항체,병수면역차수증가항체적적도야체증,차항체아형이IgG2a위주,표명주요인기Th1형적면역응답.FCM검측BCSP31/pVAX1중조표체질립적CD4+/CD8+비치명현하강,설명격발료현저적CTL효응.MTT측정BCSP31/pVAX1중조표체질립적림파세포증식능력여대조조비교차이현저.포씨간균A544강독주공독후,동물존활급비조직세균수여대조조비교유현저성차이,설명BCSP31/pVAX1중조표체질립능구산생유효적보호효과.결론연제적BCSP31/pVAX1중조표체질립면역BALB/c소서능산생고수평적특이성체액면역화세포면역,이세포면역위주,병산생유효적면역보호효과,위포씨간균병신형역묘적연구전정료기출.