食用菌学报
食用菌學報
식용균학보
ACTA EDULIS FUNGI
2008年
1期
32-41
,共10页
税丕容%郑晓冰%林俊芳%郭丽琼
稅丕容%鄭曉冰%林俊芳%郭麗瓊
세비용%정효빙%림준방%곽려경
食用菌%总RNA%STE法
食用菌%總RNA%STE法
식용균%총RNA%STE법
STE法是针对食用菌多糖含量高而设计的一种提取食用菌总RNA的有效方法.本研究以灵芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌丝体为材料,采用STE法提取其总RNA,同时以Trizol法作对照.结果表明:采用STE法提取的三种菌丝的总RNA A260/A280比值在1.80～2.10范围内,A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的总RNA A260/A280比值小于1.80, A260/A230小于1.90,明显比STE法效果差;总RNA电泳检测表明:STE法的3条带(28S rRNA、18S rRNA 和5S rRNA)清晰,无拖尾,无杂带,效果比Trizol法好;将STE法提取的总RNA进行反转录后合成双链cDNA,进行预扩增,电泳显示呈弥散状;再进行选择性扩增,有相同或相异的条带.进一步表明STE法提取的总RNA质量较高,可以满足后续分子生物学研究的要求.
STE法是針對食用菌多糖含量高而設計的一種提取食用菌總RNA的有效方法.本研究以靈芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌絲體為材料,採用STE法提取其總RNA,同時以Trizol法作對照.結果錶明:採用STE法提取的三種菌絲的總RNA A260/A280比值在1.80～2.10範圍內,A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的總RNA A260/A280比值小于1.80, A260/A230小于1.90,明顯比STE法效果差;總RNA電泳檢測錶明:STE法的3條帶(28S rRNA、18S rRNA 和5S rRNA)清晰,無拖尾,無雜帶,效果比Trizol法好;將STE法提取的總RNA進行反轉錄後閤成雙鏈cDNA,進行預擴增,電泳顯示呈瀰散狀;再進行選擇性擴增,有相同或相異的條帶.進一步錶明STE法提取的總RNA質量較高,可以滿足後續分子生物學研究的要求.
STE법시침대식용균다당함량고이설계적일충제취식용균총RNA적유효방법.본연구이령지、향고화백부진균TR16균주적균사체위재료,채용STE법제취기총RNA,동시이Trizol법작대조.결과표명:채용STE법제취적삼충균사적총RNA A260/A280비치재1.80～2.10범위내,A260/A230략대우2.00;이Trizol법제취적총RNA A260/A280비치소우1.80, A260/A230소우1.90,명현비STE법효과차;총RNA전영검측표명:STE법적3조대(28S rRNA、18S rRNA 화5S rRNA)청석,무타미,무잡대,효과비Trizol법호;장STE법제취적총RNA진행반전록후합성쌍련cDNA,진행예확증,전영현시정미산상;재진행선택성확증,유상동혹상이적조대.진일보표명STE법제취적총RNA질량교고,가이만족후속분자생물학연구적요구.
