暨南大学学报（自然科学与医学版）
暨南大學學報（自然科學與醫學版）
기남대학학보（자연과학여의학판）
JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION）
2010年
3期
312-317
,共6页
人乳头瘤病毒16型%L2基因%E7基因%pET-28a(+)
人乳頭瘤病毒16型%L2基因%E7基因%pET-28a(+)
인유두류병독16형%L2기인%E7기인%pET-28a(+)
分析广东分离株HPV16型的L2和E7基因结构,并对E7的4个功能区重新排列组合形成失去致癌作用但其抗原表位不改变,其命名为rE7,构建pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L2 4个原核表达质粒.采用PCR技术从广东分离株HPV16基因组中扩增L2基因;用重叠PCR技术人工合成rE7基因和L2-rE7、rE7-L2融合基因,并构建到原核表达载体pET-28a(+)上. 成功扩增广东分离株HPV16型 L2基因,经重叠PCR技术成功得到rE7、L2-rE7和rE7-L2基因并成功构建了原核表达的4个载体:pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L2. 广东分离株HPV16型L2基因与中国标准株有9处不同,同源性为99.37%,其编码氨基酸序列有8处突变. 成功合成失去致癌作用的基因rE7及构建4个原核表达载体.
分析廣東分離株HPV16型的L2和E7基因結構,併對E7的4箇功能區重新排列組閤形成失去緻癌作用但其抗原錶位不改變,其命名為rE7,構建pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L2 4箇原覈錶達質粒.採用PCR技術從廣東分離株HPV16基因組中擴增L2基因;用重疊PCR技術人工閤成rE7基因和L2-rE7、rE7-L2融閤基因,併構建到原覈錶達載體pET-28a(+)上. 成功擴增廣東分離株HPV16型 L2基因,經重疊PCR技術成功得到rE7、L2-rE7和rE7-L2基因併成功構建瞭原覈錶達的4箇載體:pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L2. 廣東分離株HPV16型L2基因與中國標準株有9處不同,同源性為99.37%,其編碼氨基痠序列有8處突變. 成功閤成失去緻癌作用的基因rE7及構建4箇原覈錶達載體.
분석엄동분리주HPV16형적L2화E7기인결구,병대E7적4개공능구중신배렬조합형성실거치암작용단기항원표위불개변,기명명위rE7,구건pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L2 4개원핵표체질립.채용PCR기술종엄동분리주HPV16기인조중확증L2기인;용중첩PCR기술인공합성rE7기인화L2-rE7、rE7-L2융합기인,병구건도원핵표체재체pET-28a(+)상. 성공확증엄동분리주HPV16형 L2기인,경중첩PCR기술성공득도rE7、L2-rE7화rE7-L2기인병성공구건료원핵표체적4개재체:pET-28a-L2、pET-28a-rE7、pET-28a-L2-rE7、pET-28a-rE7-L2. 엄동분리주HPV16형L2기인여중국표준주유9처불동,동원성위99.37%,기편마안기산서렬유8처돌변. 성공합성실거치암작용적기인rE7급구건4개원핵표체재체.
