皖南医学院学报
皖南醫學院學報
환남의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE WANNAN
2010年
3期
161-165
,共5页
胡卫华%王净%何向锋%褚莉莉%赵枫姝%蒋翠莲%李晓丽
鬍衛華%王淨%何嚮鋒%褚莉莉%趙楓姝%蔣翠蓮%李曉麗
호위화%왕정%하향봉%저리리%조풍주%장취련%리효려
脐血%CD34+造血干细胞%体外培养%流式细胞术
臍血%CD34+造血榦細胞%體外培養%流式細胞術
제혈%CD34+조혈간세포%체외배양%류식세포술
目的:建立稳定的CD34+脐血造血干细胞(CD34+UHSC)的体外分离、培养扩增体系,并研究其生物学特性.方法:密度梯度离心及免疫磁珠法从脐血中分离CD34+UHSC,加入细胞因子SCF、IL-3和IL-6进行体外培养扩增,观察细胞形态及其生长特性.应用流式细胞仪测定细胞周期及其CD34分子的表达,研究其增殖、生长和分化特性.以RT-PCR法检测干细胞高表达基因ABCG2的转录表达.结果:在体外培养条件下,CD34+UHSC悬浮生长,约1周后易形成克隆球,增殖旺盛,呈现指数生长期;细胞增殖周期随体外培养时间延长而逐渐趋缓;CD34+UHSC表面标志亦随体外培养时间延长而表达下降,同时ABCG2基因的表达亦逐步下调. 结论:体外获得纯化的 CD34+UHSC,生长稳定、增殖能力强,但随体外培养时间的延长,CD34+分子标志逐步丢失,提示在增殖旺盛的指数生长期7～21 d内最适用于各项相关实验研究.
目的:建立穩定的CD34+臍血造血榦細胞(CD34+UHSC)的體外分離、培養擴增體繫,併研究其生物學特性.方法:密度梯度離心及免疫磁珠法從臍血中分離CD34+UHSC,加入細胞因子SCF、IL-3和IL-6進行體外培養擴增,觀察細胞形態及其生長特性.應用流式細胞儀測定細胞週期及其CD34分子的錶達,研究其增殖、生長和分化特性.以RT-PCR法檢測榦細胞高錶達基因ABCG2的轉錄錶達.結果:在體外培養條件下,CD34+UHSC懸浮生長,約1週後易形成剋隆毬,增殖旺盛,呈現指數生長期;細胞增殖週期隨體外培養時間延長而逐漸趨緩;CD34+UHSC錶麵標誌亦隨體外培養時間延長而錶達下降,同時ABCG2基因的錶達亦逐步下調. 結論:體外穫得純化的 CD34+UHSC,生長穩定、增殖能力彊,但隨體外培養時間的延長,CD34+分子標誌逐步丟失,提示在增殖旺盛的指數生長期7～21 d內最適用于各項相關實驗研究.
목적:건립은정적CD34+제혈조혈간세포(CD34+UHSC)적체외분리、배양확증체계,병연구기생물학특성.방법:밀도제도리심급면역자주법종제혈중분리CD34+UHSC,가입세포인자SCF、IL-3화IL-6진행체외배양확증,관찰세포형태급기생장특성.응용류식세포의측정세포주기급기CD34분자적표체,연구기증식、생장화분화특성.이RT-PCR법검측간세포고표체기인ABCG2적전록표체.결과:재체외배양조건하,CD34+UHSC현부생장,약1주후역형성극륭구,증식왕성,정현지수생장기;세포증식주기수체외배양시간연장이축점추완;CD34+UHSC표면표지역수체외배양시간연장이표체하강,동시ABCG2기인적표체역축보하조. 결론:체외획득순화적 CD34+UHSC,생장은정、증식능력강,단수체외배양시간적연장,CD34+분자표지축보주실,제시재증식왕성적지수생장기7～21 d내최괄용우각항상관실험연구.
