中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2010年
11期
844-848
,共5页
潘群兴%王永山%何孔旺%欧阳伟%王晓丽%诸玉梅%夏兴霞
潘群興%王永山%何孔旺%歐暘偉%王曉麗%諸玉梅%夏興霞
반군흥%왕영산%하공왕%구양위%왕효려%제옥매%하흥하
猪细小病毒%病毒样颗粒%O型口蹄疫病毒%T细胞表位
豬細小病毒%病毒樣顆粒%O型口蹄疫病毒%T細胞錶位
저세소병독%병독양과립%O형구제역병독%T세포표위
为增强表位疫苗的免疫原性,本研究将O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1中编码T细胞表位肽(aa 21～aa 40)序列连接于猪细小病毒(PPV)VP2的5'端,并插入到杆状病毒供体质粒pFastBac HTA中,构建成重组转座载体pFastBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,转化舍有穿梭载体Bacmid的E.coli DH10Bac中,经蓝白菌落筛选获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,转染昆虫草地夜蛾(S19)细胞,并在Sf9中进行了表达.电镜观察显示,表达的重组蛋白能够自我组装成病毒样颗粒rPPV:VLP(FMDV).用间接免疫荧光试验(IFA)、western blot分析表明,表达产物具有与PPV VP2天然蛋白相似的免疫原性.小鼠免疫实验证实,在低浓度FMDV抗原下能够产生特异性T淋巴细胞增殖反应;而且该病毒样颗粒能诱导机体产生抗FMDV特异性细胞免疫反应.
為增彊錶位疫苗的免疫原性,本研究將O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1中編碼T細胞錶位肽(aa 21～aa 40)序列連接于豬細小病毒(PPV)VP2的5'耑,併插入到桿狀病毒供體質粒pFastBac HTA中,構建成重組轉座載體pFastBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,轉化捨有穿梭載體Bacmid的E.coli DH10Bac中,經藍白菌落篩選穫得重組桿狀病毒錶達質粒rBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,轉染昆蟲草地夜蛾(S19)細胞,併在Sf9中進行瞭錶達.電鏡觀察顯示,錶達的重組蛋白能夠自我組裝成病毒樣顆粒rPPV:VLP(FMDV).用間接免疫熒光試驗(IFA)、western blot分析錶明,錶達產物具有與PPV VP2天然蛋白相似的免疫原性.小鼠免疫實驗證實,在低濃度FMDV抗原下能夠產生特異性T淋巴細胞增殖反應;而且該病毒樣顆粒能誘導機體產生抗FMDV特異性細胞免疫反應.
위증강표위역묘적면역원성,본연구장O형구제역병독(FMDV)VP1중편마T세포표위태(aa 21～aa 40)서렬련접우저세소병독(PPV)VP2적5'단,병삽입도간상병독공체질립pFastBac HTA중,구건성중조전좌재체pFastBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,전화사유천사재체Bacmid적E.coli DH10Bac중,경람백균락사선획득중조간상병독표체질립rBac-FMDV-VP1-PPV-VP2,전염곤충초지야아(S19)세포,병재Sf9중진행료표체.전경관찰현시,표체적중조단백능구자아조장성병독양과립rPPV:VLP(FMDV).용간접면역형광시험(IFA)、western blot분석표명,표체산물구유여PPV VP2천연단백상사적면역원성.소서면역실험증실,재저농도FMDV항원하능구산생특이성T림파세포증식반응;이차해병독양과립능유도궤체산생항FMDV특이성세포면역반응.
