中国草地学报
中國草地學報
중국초지학보
CHINESE JOURNAL OF GRASSLAND
2012年
1期
77-83
,共7页
俞靓%井赵斌%魏琳%程积民
俞靚%井趙斌%魏琳%程積民
유정%정조빈%위림%정적민
本氏针茅%ISSR%体系优化
本氏針茅%ISSR%體繫優化
본씨침모%ISSR%체계우화
以CTAB法提取的本氏针茅(Stipa bungeana Trin.)基因组DNA为模板,采用正交试验设计和单因素分析相结合的方法,对影响本氏针茅ISSR- PCR反应体系中的DNA、Taq酶、dNTPs、引物和Mg2+进行优化,旨在建立适合本氏针茅ISSR- PCR分析的最佳反应体系.结果表明,在20μL的反应体系中各组分的浓度分别为:DNA(20ng/μL)2.5μL、Taq DNA酶(5U/μL)0.1μL、dNTPs(2.5mmol/L)1.6μL、引物(10μmol/L)2.3μL、Mg2+(25mmol/L)1.4μL、10×Buffer 2.5μL、ddH2O 9.6μL.经过体系验证和引物筛选试验表明该体系适于本氏针茅遗传多样性分析,该体系的建立为本氏针茅种质资源遗传多样性研究提供了理论基础.
以CTAB法提取的本氏針茅(Stipa bungeana Trin.)基因組DNA為模闆,採用正交試驗設計和單因素分析相結閤的方法,對影響本氏針茅ISSR- PCR反應體繫中的DNA、Taq酶、dNTPs、引物和Mg2+進行優化,旨在建立適閤本氏針茅ISSR- PCR分析的最佳反應體繫.結果錶明,在20μL的反應體繫中各組分的濃度分彆為:DNA(20ng/μL)2.5μL、Taq DNA酶(5U/μL)0.1μL、dNTPs(2.5mmol/L)1.6μL、引物(10μmol/L)2.3μL、Mg2+(25mmol/L)1.4μL、10×Buffer 2.5μL、ddH2O 9.6μL.經過體繫驗證和引物篩選試驗錶明該體繫適于本氏針茅遺傳多樣性分析,該體繫的建立為本氏針茅種質資源遺傳多樣性研究提供瞭理論基礎.
이CTAB법제취적본씨침모(Stipa bungeana Trin.)기인조DNA위모판,채용정교시험설계화단인소분석상결합적방법,대영향본씨침모ISSR- PCR반응체계중적DNA、Taq매、dNTPs、인물화Mg2+진행우화,지재건립괄합본씨침모ISSR- PCR분석적최가반응체계.결과표명,재20μL적반응체계중각조분적농도분별위:DNA(20ng/μL)2.5μL、Taq DNA매(5U/μL)0.1μL、dNTPs(2.5mmol/L)1.6μL、인물(10μmol/L)2.3μL、Mg2+(25mmol/L)1.4μL、10×Buffer 2.5μL、ddH2O 9.6μL.경과체계험증화인물사선시험표명해체계괄우본씨침모유전다양성분석,해체계적건립위본씨침모충질자원유전다양성연구제공료이론기출.
