癌变·畸变·突变
癌變·畸變·突變
암변·기변·돌변
CARCINOGENSES,TERATOGENSIS AND MUTAGENESIS
2012年
4期
266-269
,共4页
孙建莉%何冬梅%张敏%任晓静%申慧琴%武希润%王琦
孫建莉%何鼕梅%張敏%任曉靜%申慧琴%武希潤%王琦
손건리%하동매%장민%임효정%신혜금%무희윤%왕기
人类吲哚胺2,3-双加氧酶%人类白细胞抗原-G%SMMC-7721细胞
人類吲哚胺2,3-雙加氧酶%人類白細胞抗原-G%SMMC-7721細胞
인류신타알2,3-쌍가양매%인류백세포항원-G%SMMC-7721세포
目的:探讨人类吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)对肝癌细胞人类白细胞抗原-G(human leucocyte antigen-G,HLA-G)表达的影响.方法:用脂质体lipofectamineTM2000将pcDNA3.1-IDO重组质粒稳定转染入肝癌SMMC-77 2 1细胞作为实验组(pcDNA3.1-IDO质粒转染组),同时设置空载体对照组(pcDNA3.1转染组)和空白对照组(未转染组),用RTPCR和Western blot鉴定实验组和2个对照组细胞IDO mRNA和蛋白的表达,然后分别给予实验组细胞IDO的抑制剂(2.5 mmol/L 1-DMT)和底物(200μmol/L L-色氨酸)干预48 h,进一步用实时荧光定量PCR和Westernblot检测上述5组细胞中HLA-G mRNA和蛋白的表达水平.结果:RT-PCR和Western blot显示空载体对照组和空白对照组未见IDO表达,而实验组细胞高表达IDO.实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,实验组HLA-G mRNA和蛋白表达水平较空载体对照组和空白对照组均明显上调(P均<0.05),给予1-D-MT和L-色氨酸干预后此效应可逆转.结论:在肝癌SMMC-7721细胞,IDO可以上调HLA-G的表达,色氨酸降解途径参与了此调节过程.
目的:探討人類吲哚胺2,3-雙加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)對肝癌細胞人類白細胞抗原-G(human leucocyte antigen-G,HLA-G)錶達的影響.方法:用脂質體lipofectamineTM2000將pcDNA3.1-IDO重組質粒穩定轉染入肝癌SMMC-77 2 1細胞作為實驗組(pcDNA3.1-IDO質粒轉染組),同時設置空載體對照組(pcDNA3.1轉染組)和空白對照組(未轉染組),用RTPCR和Western blot鑒定實驗組和2箇對照組細胞IDO mRNA和蛋白的錶達,然後分彆給予實驗組細胞IDO的抑製劑(2.5 mmol/L 1-DMT)和底物(200μmol/L L-色氨痠)榦預48 h,進一步用實時熒光定量PCR和Westernblot檢測上述5組細胞中HLA-G mRNA和蛋白的錶達水平.結果:RT-PCR和Western blot顯示空載體對照組和空白對照組未見IDO錶達,而實驗組細胞高錶達IDO.實時熒光定量PCR和Western blot結果顯示,實驗組HLA-G mRNA和蛋白錶達水平較空載體對照組和空白對照組均明顯上調(P均<0.05),給予1-D-MT和L-色氨痠榦預後此效應可逆轉.結論:在肝癌SMMC-7721細胞,IDO可以上調HLA-G的錶達,色氨痠降解途徑參與瞭此調節過程.
목적:탐토인류신타알2,3-쌍가양매(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)대간암세포인류백세포항원-G(human leucocyte antigen-G,HLA-G)표체적영향.방법:용지질체lipofectamineTM2000장pcDNA3.1-IDO중조질립은정전염입간암SMMC-77 2 1세포작위실험조(pcDNA3.1-IDO질립전염조),동시설치공재체대조조(pcDNA3.1전염조)화공백대조조(미전염조),용RTPCR화Western blot감정실험조화2개대조조세포IDO mRNA화단백적표체,연후분별급여실험조세포IDO적억제제(2.5 mmol/L 1-DMT)화저물(200μmol/L L-색안산)간예48 h,진일보용실시형광정량PCR화Westernblot검측상술5조세포중HLA-G mRNA화단백적표체수평.결과:RT-PCR화Western blot현시공재체대조조화공백대조조미견IDO표체,이실험조세포고표체IDO.실시형광정량PCR화Western blot결과현시,실험조HLA-G mRNA화단백표체수평교공재체대조조화공백대조조균명현상조(P균<0.05),급여1-D-MT화L-색안산간예후차효응가역전.결론:재간암SMMC-7721세포,IDO가이상조HLA-G적표체,색안산강해도경삼여료차조절과정.