山西农业科学
山西農業科學
산서농업과학
JOURNAL OF SHANXI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
7期
701-704
,共4页
白云凤%闫建俊%张耀%张忠梁%冯瑞云%张维锋
白雲鳳%閆建俊%張耀%張忠樑%馮瑞雲%張維鋒
백운봉%염건준%장요%장충량%풍서운%장유봉
马铃薯纺锤块茎类病毒%山西分离物%序列分析%体外转录%侵染性克隆
馬鈴藷紡錘塊莖類病毒%山西分離物%序列分析%體外轉錄%侵染性剋隆
마령서방추괴경류병독%산서분리물%서렬분석%체외전록%침염성극륭
马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viriod,PSTVd)侵染马铃薯会严重影响薯块的产量和品质.根据PSTVd的同源序列设计引物,以山西省马铃薯感病块茎中提取的总RNA为模板,经RT-PCR方法扩增出全长cDNA片段,将其克隆到质粒pBS-T载体上,进行序列分析.结果表明,该类病毒全长359 nt,能通过分子内序列互补形成致密的二级结构.以该序列作为种子序列进行Blast搜索,该序列与PSTVd荷兰分离物(GenBank登陆号:AY372400.1)的序列一致性为100%.将该序列与东北株系、河北株系及已公布的弱株系(GenBank登陆号:M14814.1)、强株系(GenBank登陆号:U23058.1)、中间株系(GenBank登陆号:AY937179.1)比对,有12个核苷酸具有多态性,其中有5个发生在致病区.将线性化的质粒pBS-PSTVd及其PSTVd的体外转录产物接种番茄矮红宝的无毒苗,20d后接种株轻微显症,RT-PCR检测均呈阳性.将RT-PCR产物测序,其结果与接种的PSTVd原序列完全一致,证实构建的PSTVd山西分离物的克隆具有侵染性.
馬鈴藷紡錘塊莖類病毒(Potato spindle tuber viriod,PSTVd)侵染馬鈴藷會嚴重影響藷塊的產量和品質.根據PSTVd的同源序列設計引物,以山西省馬鈴藷感病塊莖中提取的總RNA為模闆,經RT-PCR方法擴增齣全長cDNA片段,將其剋隆到質粒pBS-T載體上,進行序列分析.結果錶明,該類病毒全長359 nt,能通過分子內序列互補形成緻密的二級結構.以該序列作為種子序列進行Blast搜索,該序列與PSTVd荷蘭分離物(GenBank登陸號:AY372400.1)的序列一緻性為100%.將該序列與東北株繫、河北株繫及已公佈的弱株繫(GenBank登陸號:M14814.1)、彊株繫(GenBank登陸號:U23058.1)、中間株繫(GenBank登陸號:AY937179.1)比對,有12箇覈苷痠具有多態性,其中有5箇髮生在緻病區.將線性化的質粒pBS-PSTVd及其PSTVd的體外轉錄產物接種番茄矮紅寶的無毒苗,20d後接種株輕微顯癥,RT-PCR檢測均呈暘性.將RT-PCR產物測序,其結果與接種的PSTVd原序列完全一緻,證實構建的PSTVd山西分離物的剋隆具有侵染性.
마령서방추괴경류병독(Potato spindle tuber viriod,PSTVd)침염마령서회엄중영향서괴적산량화품질.근거PSTVd적동원서렬설계인물,이산서성마령서감병괴경중제취적총RNA위모판,경RT-PCR방법확증출전장cDNA편단,장기극륭도질립pBS-T재체상,진행서렬분석.결과표명,해류병독전장359 nt,능통과분자내서렬호보형성치밀적이급결구.이해서렬작위충자서렬진행Blast수색,해서렬여PSTVd하란분리물(GenBank등륙호:AY372400.1)적서렬일치성위100%.장해서렬여동북주계、하북주계급이공포적약주계(GenBank등륙호:M14814.1)、강주계(GenBank등륙호:U23058.1)、중간주계(GenBank등륙호:AY937179.1)비대,유12개핵감산구유다태성,기중유5개발생재치병구.장선성화적질립pBS-PSTVd급기PSTVd적체외전록산물접충번가왜홍보적무독묘,20d후접충주경미현증,RT-PCR검측균정양성.장RT-PCR산물측서,기결과여접충적PSTVd원서렬완전일치,증실구건적PSTVd산서분리물적극륭구유침염성.