CAJ | 학술논문

目的探讨转染Smac基因过表达对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响,寻求改善宫颈癌放疗疗效的新途径.方法将Smac基因转染入宫颈癌HeLa细胞株,G418筛选获得亚克隆细胞,RT-PCR、Western blot法检测癌细胞Smac基因表达.X射线照射后,采用MTT比色法检测癌细胞体外生长活性;透射电镜、Annexin V-FITC和碘化丙啶双染色流式细胞仪法检测癌细胞凋亡及比率;Westernblot、比色法检测细胞内Caspase-3蛋白表达和活性水平.结果RT-PCR和Western blot证实所获宫颈癌亚克隆细胞HeLa/Smac的Smac mRNA、蛋白表达水平均显著高于HeLa(P＜0.01).8 Gy X射线照射后,HeLa/Smac细胞生长活性较HeLa细胞减弱10.19%(P＜0.01),透射电镜下可见部分HeLa/Smac细胞发生典型凋亡形态学改变,凋亡率为16.4%,显著高于对照组HeLa细胞(凋亡率为6.2%,P＜0.01).与HeLa细胞比较,HeLa/Smac细胞内Caspase-3表达显著增加(P＜0.01),活性水平提高3.42倍(P＜0.01).结论稳定转染外源性Smac基因使其在宫颈癌细胞株中过表达,能提高癌细胞中Caspase-3的表达和活性,增强放疗对癌细胞的诱导凋亡作用,有望成为改善宫颈癌放疗效果的新途径.
목적탐토전염Smac기인과표체대궁경암세포방료민감성적영향,심구개선궁경암방료료효적신도경.방법장Smac기인전염입궁경암HeLa세포주,G418사선획득아극륭세포,RT-PCR、Western blot법검측암세포Smac기인표체.X사선조사후,채용MTT비색법검측암세포체외생장활성;투사전경、Annexin V-FITC화전화병정쌍염색류식세포의법검측암세포조망급비솔;Westernblot、비색법검측세포내Caspase-3단백표체화활성수평.결과RT-PCR화Western blot증실소획궁경암아극륭세포HeLa/Smac적Smac mRNA、단백표체수평균현저고우HeLa(P＜0.01).8 Gy X사선조사후,HeLa/Smac세포생장활성교HeLa세포감약10.19%(P＜0.01),투사전경하가견부분HeLa/Smac세포발생전형조망형태학개변,조망솔위16.4%,현저고우대조조HeLa세포(조망솔위6.2%,P＜0.01).여HeLa세포비교,HeLa/Smac세포내Caspase-3표체현저증가(P＜0.01),활성수평제고3.42배(P＜0.01).결론은정전염외원성Smac기인사기재궁경암세포주중과표체,능제고암세포중Caspase-3적표체화활성,증강방료대암세포적유도조망작용,유망성위개선궁경암방료효과적신도경.